Microinyecciones localizadas y Metodología esterotáxica

HEPP Y.; FREUDENTHAL RAMIRO; MALDONADO HÉCTOR; PEDREIRA M. E.

Buzios-Brasil

Congreso; I Congreso IBRO/LARC de Neurociencias de América Latina, Caribe y Península Ibérica (NEUROLATAM).; 2008

I Congreso IBRO/LARC de Neurociencias de América Latina, Caribe y Península Ibérica (NEUROLATAM)

Título: Microinyecciones localizadas y Metodología esterotáxica en el cangrejo Chasmagnathus granulatus. Autores: Yanil Hepp, Héctor Maldonado y María Eugenia Pedreira Laboratorio de Neurobiología de la Memoria. Departamento de Fisiología, Biología Molecular y Celular. IFIBYNE-CONICET, Facultad Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires, Argentina. E-mail: yanil@fbmc.fcen.uba.ar ; hector@fbmc.fcen.uba.ar; mpedreira@fbmc.fcen.uba.ar Los experimentos farmacológicos desarrollados previamente en el laboratorio con el cangrejo Chasmagnathus granulatus, basados en la administración sistémica de diversos tipos de drogas, permitieron delinear conclusiones acerca de los mecanismos moleculares que sirven a la consolidación de la memoria contexto-señal (MCS), así como a las fases de reconsolidación y extinción. Un abordaje similar pero localizado, como muestran numerosos trabajos en vertebrados, ayudaría a determinar la funcionalidad de distintas áreas del sistema nervioso central en diversas fases del proceso mnésico. Uno de los métodos utilizados para la identificación de estructuras implicadas en procesos mnésico se basa en la destrucción neuronal por medio de microinyecciones localizadas de sustancias neurotóxicas, como el ácido iboténico. Éste es un agonista glutamatérgico que ha demostrado tener una acción localizada, por destrucción de cuerpos neuronales en el área de administración. Considerando estos antecedentes, el objetivo del Proyecto es desarrollar una técnica de microinyecciones precisamente localizadas, que permita administrar sustancias neurotóxicas en áreas potencialmente involucradas en alguna fase del proceso de memoria. Un primer paso para el desarrollo de la técnica propuesta, implica la puesta a punto de un método estereotáxico. Los resultados hasta ahora obtenidos muestran que es posible establecer un sistema de coordenadas externas en el pedúnculo ocular del cangrejo, basándose en la forma, orientación y ubicación de la pseudopupila, además de considerar características anatómicas externas, permitiendo así ubicar en forma precisa una región de interés. Luego de la microinyección de Ioduro de Propidio en el área elegida se pudo localizar, por microscopía confocal, la zona de inyección y conocer las dimensiones del área afectada por la misma. En resumen, los antecedentes en vertebrados, los resultados a nivel periférico en este modelo de invertebrado, y el rol ya descripto de receptores tipo NMDA a nivel mnésico, apoyan fuertemente el desarrollo de esta metodología para ser aplicada en estudios de memoria en Chasmagnathus.