Participación del receptor p75 de TNFa y del factor de transcripción AP-1 en la inducción de la expresión del factor inhibidor de leucemias (LIF) desencadenada por TNFa en células epiteliales mamarias.

SCHERE-LEVY, C.; SLOMIANSKY, V.; FERRAMOLA, M.; DI GENARO, M.; COSO, O.; KORDON, E.

Mar del Plata, Buenos Aires.

Congreso; Sociedad Argentina de Investigación Clínica. Noviembre 2006. Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina. Medicina, vol.66 No 5/2, 2006.; 2006

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Se ha demostrado que el Factor Inhibidor de Leucemias (LIF) induce la apoptosis del epitelio mamario al finalizar el amamantamiento. Previamente habíamos reportado que TNFa presenta un patrón de expresión similar al LIF en tejido mamario in vivo y que TNFa induce la expresión de LIF a través de la activación de la quinasa Erk1/2 en células epitelilales mamarias SCp2. El objetivo del presente trabajo fue determinar la participación del factor de transcripción AP-1 y de ambos receptores de TNFa: p55 y p75 en la expresión del LIF inducida por TNFa. Mediante el ensayo de cambio de movilidad electroforética (EMSA), hallamos que el tratamiento de células SCp2 con TNFa induce la activación de AP-1, la cual es bloqueada por el inhibidor farmacológico de la fosforilación de Erk1/2, PD98059. Además mediante EMSA supershift encontramos que c-Jun formaría parte del complejo AP-1 activado. Dado que la proteína c-Fos también puede formar parte de este complejo, evaluamos la inducción de la expresión y activación de esta proteína. Resultados obtenidos mediante RT-PCR en tiempo real y por ensayo de Western blot, mostraron que TNFa induce la transcripción de c-fos y la traslocación de la proteína c-Fos en el núcleo. Por otro lado, con el objeto de determinar el tipo de receptor de TNFa involucrado en la inducción de la expresión de LIF, las células fueron tratadas con anticuerpos antagonistas específicos para ambos receptores. Mediante ensayos de RT-PCR encontramos que únicamente el uso del anticuerpo anti p75 inhibió la expresión del LIF inducida por TNFa. Además, observaciones realizadas en ratones p55-/- a 48hs de iniciada la involución no mostraron una significativa inhibición de la expresión de LIF cuando se comparó con animales salvajes. En conjunto, estos resultados sugieren que en células epiteliales mamarias el TNFa induce la expresión de LIF a través de su interacción con p75, la fosforilación de Erk1/2 y la sucesiva activación del factor de transcripción AP-1.