Terapia Fotodinámica a partir de ALA combinada con irradiación infrarroja, como alternativa para el tratamiento de infecciones bacterianas.

TOMAS, S; SAENZ, D; MAMONE, L; CÉSPEDES, M; CASAS, A; CALVO, G; DI VENOSA, G

Rosario, Santa Fe, Argentina.

Encuentro; VI Reunión de Fotobiólogos Moleculares Argentinos (VI GRAFOB); 2022

Grupo Argentino de Fotobiología

Terapia Fotodinámica a partir de ALA combinada con irradiación infrarroja, como alternativa para el tratamiento de infecciones bacterianas.Tomás, Sebastián; Calvo, Gustavo; Céspedes, Mariela; Sáenz, Daniel; Di Venosa, Gabriela; Casas, Adriana; Mamone, Leandro1: CIPYP, Hospital de Clínicas José de San Martín, CONICET, UBA, Buenos Aires, Argentina.Presentador/a: Tomas, Sebastián Email: rstomas84@gmail.comRESUMEN: La Terapia Fotodinámica Antimicrobiana (TFDA) combina un compuesto fotosensibilizante (FS) con luz visible dando lugar a especies reactivas que provocan la inactivación de microorganismos[1]. Por otra parte, la Terapia Fototérmica (TFT) emplea luz del espectro infrarrojo cercano, para liberar energía en forma de calor, mediante la excitación de moléculas de agua o cromóforos internos[2].El ácido 5-aminolevulínico (ALA) es un precursor de la síntesis endógena de porfirinas, fotosensiblizantes tanto en células eucariotas como en bacterias.El objetivo de este trabajo fue evaluar la producción de porfirinas, luego de topicar ALA, en un modelo in vivo de infección subcutánea de Staphylococcus aureus en ratones y registrar el efecto de la TFDA sobre la evolución de dichas infecciones. Además, se empleó la TFT esperando incrementar la síntesis de porfirinas a partir de ALA.Se infectaron ratones BALB/c y CF-1, inoculando intradérmicamente una suspensión de S. aureus RN6390. Luego de 48 h, se topicó una solución de ALA 20 mg/ml, sobre la piel en la zona de la infección y se evaluó la fluorescencia emitida bajo lámpara de 365 nm y diferentes filtros ópticos.La TFDA se efectuó empleando lámparas halógenas (500 W, GE, 58 J/cm2). Se determinó la progresión de las infecciones durante 48 h luego de la TFDA, midiendo el área de infección.Para la TFT se empleó un láser de 980 nm en condiciones que no elevaron la temperatura de la piel por sobre los 37 ⁰C (3 dosis de 10 seg a 8 W). Se determinó el tipo de porfirinas producidas a partir de ALA con o sin exposición a TFT mediante espectroscopía de fluorescencia a partir de homogenatos de piel y se observó localización de porfirinas por microscopía de fluorescencia en cortes frescos de piel.La síntesis máxima de porfirinas en las pieles topicadas con ALA, se observó a las 4 h. Luego de extracción química, se encontraron niveles más altos de porfirinas en las pieles infectadas que en las no infectadas. Sin embargo, la fluorescencia directa bajo luz de 365 nm fue indetectable sobre las infecciones, pero fue posible observarla desde la cara interna de la piel (luego de sacrificar los ratones). A pesar de ello, las imágenes de microscopía de fluorescencia mostraron porfirinas en la zona superficial de las pieles infectadas (epidermis). Por otra parte, resultados preliminares de microscopía de fluorescencia sugieren que la TFT aumentó la síntesis de porfirinas en las pieles infectadas. Los perfiles fluorométricos indicaron que la principal porfirina sintetizada fue Protoporfirina IX.Se observó además, una tendencia a la reducción del área de las infecciones luego de la TFDA con ALA respecto a los controles sin tratar.Estos resultados sugieren que el ALA-TFDA sería un tratamiento promisorio de infecciones superficiales en combinación con la TFT y particularmente, el ALA es una molécula que podría ser empleada en la detección y seguimiento de infecciones.1.Ibelli T, Templeton S, Levi-Polyachenko N. Progress on utilizing hyperthermia for mitigating bacterialinfections. International Journal of Hyperthermia (2018).2.Amos-Tautua B, Songca S, Oluwafemi O. Application of Porphyrins in Antibacterial Photodynamic Therapy.Molecules (2019).Área temática: TERAPIA FOTODINÁMICA/FOTOINACTIVACIÓN DE PATÓGENOS