Determinación de la relación GSH/GSSG mediante técnicas electroquímicas

V. PFAFFEN; P. I. ORTIZ; D. WUNDERLIN

Bahía Blanca, Buenos Aires

Congreso; VII Congreso Argentino de Química Analítica.; 2009

Asociación Argentina de Química Analítica

Los compuestos tóxicos son absorbidos o adsorbidos en el sedimento (o arrastrados por el agua desde suelos contaminados), otros son captados por la biota mediante incorporación activa (metabolismo, bioacumulación, etc.), o por fenómenos de ad-/absorción en tejidos (raíces, etc.), otros son degradados por microbios presentes en el hábitat, o en otros casos se volatilizan parcialmente pasando la contaminación al aire. Este conjunto de fenómenos concurrentes le agrega dificultad a la determinación de la calidad del agua. El resultado es que, muchas veces, los métodos de análisis químico-instrumental no logran detectar cantidades pequeñas de contaminantes que, sin embargo, tienen acción sobre la biota (aguda o crónica) [1,2]. Para suplir en parte esta limitación, y como complemento necesario a los métodos químicos, se han desarrollado métodos biológicos que permiten medir efectos producidos por los tóxicos, tratando de asociar estos efectos con las posibles causas que los generan. Es así que los términos bio-indicadores se refieren a organismos que manifiestan una respuesta dada a una situación de estrés tóxico. La medición de tales respuestas genera bio-marcadores que permiten observar y cuantificar el daño producido. Existen parámetros indicadores de estrés oxidativo como biomarcadores de contaminación. La formación de especies reactivas de oxígeno es un proceso que, en la mayor parte de los casos, se deduce de la medición de sus efectos, como los desbalances que se producen en los sistemas antioxidantes naturales, por ejemplo las variaciones en la relación de glutatión reducido y oxidado (GSH/GSSG). En este trabajo se propone la determinación de la relación GSH/GSSG mediante amperometría. El GSH se cuantifica por oxidación directa a 0,7 V sobre carbono grafito, mientras que con un electrodo compósito de microparticulas de cobre dispersos en carbono grafito a 0,4 V se cuantifica tanto GSH como GSSG. Se analizó el comportamiento del sistema en diferentes medios (solución reguladora de fosfato y de acetato) y valores de pH. Se estableció que las condiciones óptimas para la determinación es: solución reguladora de fosfato a pH 7 y con un 12% de microparticulas de cobre. Los sensores mostraron una dependencia lineal para ambos analitos lo que permitió establecer los límites de detección y cuantificación para la técnica propuesta.