Inmovilización de lectinas sobre electrodos de oro modificados con sales de diazonio,

, MARÍA VICTORIA BRACAMONTE, NANCY F. FERREYRA*; SOLEDAD BOLLO,; NANCY FERREYRA

Mendoza

Congreso; VII Congreso Argentino Química Analítica.; 2013

Asociación Argentina de Químicos Analiticos

Las sales de diazonio derivadas de aminas aromáticas (SD) han cobrado interés por su empleo en la modificación de superficies, ya que sus derivados forman enlaces covalentes sobre materiales conductores y semiconductores [1]. La electroreducción de las SD generadas in situ ofrece una metodología relativamente simple y permite la modificación superficial con una amplia variedad de grupos funcionales (carboxilos, tioles, aminos, nitritos, etc.). Estas funciones químicas pueden emplearse para inmovilizar biomoléculas tales como enzimas, ADN, anticuerpos y lectinas, que otorguen a las superficies capacidad de reconocimiento molecular, haciéndolas aptas para el desarrollo de sensores y biosensores [2]. En este trabajo se estudió la inmovilización de la lectina Concanavalina A (ConA) sobre electrodos de oro modificados con SD derivadas de los ácidos 4-aminobenzoico (PABA), ácido 3-(4 aminofenil) propiónico (PAPA) y ácido 4-(4 aminofenil) butírico. Las SD, obtenidas in situ por reacción de las arilaminas con NaNO2 en medio ácido, fueron electro-reducidas empleando métodos potenciostáticos y potenciodinámicos. Se optimizó la modificación superficial evaluando el efecto de la relación de concentraciones arilamina/NaNO2. Se caracterizaron las superficies modificadas por voltamperometría cíclica (VC) y espectroscopia de impedancia electroquímica (EIE) en presencia de diferentes cuplas redox. Mediante microbalanza de cristal de cuarzo se analizaron la carga y la masa involucradas en los procesos de adsorción de las diferentes arilaminas y se compararon los cubrimientos superficiales logrados. Se estudió la adsorción covalente de ConA sobre los electrodos modificados y la interacción de ConA con glucosa empleando resonancia de plasmón superficial, VC y EIE. Los resultados obtenidos indican que las superficies de oro modificadas con SD presentan una estructura con huecos o defectos y zonas de cubrimiento con espesores superiores al de 1 monocapa. La longitud de la cadena sustituyente influye en el cubrimiento superficial logrado. La estructura de la superficie Oro/SD, de alta rugosidad, favorece la adsorción de Con A y permite lograr cubrimientos 4 veces superiores al valor de una monocapa compacta de lectina. La biomolécula adsorbida retiene su capacidad de biorreconocimiento selectivo a glucosa.