Biosensor de glucosa basado en la inmovilización de glucosa oxidasa sobre electrodos de carbono vítreo modificados con nanotubos de carbono y polihistidina

P. D. DALMASSO; M. L. PEDANO; G. A. RIVAS

Santa Fe

Congreso; VI Congreso Argentino De Química Analítica,; 2011

Universidad Nacional del Litoral

La inmovilización de biomoléculas mediante la técnica de autoensamblado capa porcapa, introducida por Decher en 1991 ha recibido gran atención en los últimos años,destacándose la preparación de biosensores empleando superficies nanoestructuradas denanotubos de carbono (CNT) solubilizados con polímeros iónicos, lo que permite el diseñode dispositivos que mejoran su capacidad para la inmovilización estable de biomoléculastales como ácidos nucleicos, proteínas y enzimas. De este modo, se obtienen materialeshíbridos con gran estabilidad y elevada capacidad electrocatalítica y biosensora.En este trabajo se presenta un biosensor enzimático para la determinaciónamperométrica de glucosa basado en la inmovilización de glucosa oxidasa (GOx) sobreelectrodos de carbono vítreo (GCE) modificados con una dispersión de nanotubos decarbono de pared múltiple (MWCNT) dispersos en polihistidina (PoliHis), polímerocargado positivamente en las condiciones de trabajo. La dispersión empleada se obtuvo porsonicación durante 30 minutos de 1,0 mg/mL de MWCNT en una solución de PoliHis0,25 mg/mL preparada en etanol/?buffer? acetato 0,200 M pH = 5,00 (75:25 V/V).Se evaluó la influencia de variables experimentales tales como la concentración deGOx y los tiempos de adsorción de la misma, y la incorporación de capas alternadas dePoliHis/GOx o PoliHis-MWCNT/GOx en las características analíticas del biosensorresultante. La señal analítica se obtuvo amperométricamente a 700 mV a partir de laoxidación del peróxido de hidrógeno generado enzimáticamente, la cual es catalizada porlos MWCNT presentes en la capa de biorreconocimiento. Con el objeto de evitar lainterferencia en la determinación de glucosa de compuestos habitualmente presentes en losfluidos biológicos como ácido ascórbico (AA) y ácido úrico (AU), se empleó Nafion comobarrera anti-interferentes.Los resultados obtenidos demuestran que la combinación de laspropiedades de PoliHiscomo agente dispersante, la actividad catalítica de los MWCNT hacia la oxidación delperóxido de hidrógeno, las propiedades permselectivas del Nafion y la robustez de laarquitectura supramolecular con GOx, hacen posible una determinación de glucosa rápida,sensible y selectiva.