EFECTO DE LA CITOCALASINA D EN LA AGREGACIÓN Y COMPACTACIÓN DE ESFERAS CELULARES DE CARCINOMA DE OVARIO

MASNER M.; LUJEA N.; KUNDA P.; PAGLINI G.

Cordoba

Congreso; XXIII Jornada de la Sociedad de Biología de Córdoba; 2019

La reorganización de los filamentos de actina permite generar las fuerzas necesarias para modificar la forma de las células y de los tejidos. Esta organización se da en respuesta a señales extracelulares e intracelulares. Trabajos previos de nuestro laboratorio, han sugerido que la célula necesita de un soporte mecánico para que viva y se divida normalmente, sin embargo, células creciendo en contextos mecánicamente menos definidos tienen que resolver la escasez de soporte para sobrevivir y dividirse. Se cree que el citoesqueleto de actina cortical junto con proteínas asociadas seríael responsable de proporcionar esa rigidez. Un sistema biológico altamente eficiente para sobrevivir y proliferar aún en medio líquido, es el cáncer de ovario epitelial (COE). Durante la diseminación del COE, las células se desprenden del tumor primario y son movidas a la cavidad peritoneal donde sobreviven embebidas en el fluido celómico.Estas células metastásicas tienen la capacidad de sobrevivir, dividirse y agregarse formando esferas celulares, a pesar de estar en un medio con poca rigidez.En este trabajo usamos como modelo de COE la línea celular de cáncer de ovario epitelial SKOV3 para determinar si el citoesqueleto de actina está involucrado en la sobrevida celular y formarción las esferas celulares. Utilizamos Citocalasina D (CD) para perturbar la polimerización de la actina. Se generaron esferas SKOV3 mediante el método in vitro de agregación celular. Las esferas fueron expuestas a distintas concentraciones de CD por 12, 24, 48, 72 y 96 hs. Luego de cada tiempo se realizó inmunofluorescencia con DAPI y Faloidina. Las imágenes fueron tomadas con microscopio invertido de fluorescencia Olympus IX81.Se observó una disrupción del citoesqueleto de actina en monocapas celulares a concentraciones bajas de 0,5 µM de CD a 24 hs post tratamiento. Por otro lado, se observó una menor agregación de las células de la esfera comparadas con las esferas sin tratamiento, sugiriendo que la integridad del citoesqueleto de actina es necesario para la formación y compactación de las esferas en medios blandos.En este trabajo se determinaron las concentraciones óptimas de CD para obtener un efecto sobre la integridad del citoesqueleto de actina en células SKOV3 y se puso en evidencia la importancia de una corteza de una actina correctamente estructurada en la formación de las esferas celulares. Nosotros proponemos que el citoesqueleto de cortical de actina podría juegar un rol importante en la sobrevida y estabilidad de las esferas dentro del peritoneo de pacientes con cáncer de ovario