El virus Pixuna (Encefalitis Equina Venezolana subtipo IV) modifica el citoesqueleto de la célula hospedadora para una la infección eficiente

ALBRIEU LLINÁS GUILLERMO; PAGLINI MARÍA GABRIELA; GIL PEDRO; KUNDA, PATRICIA; CUFFINI CECILIA

BsAS

Congreso; XII Congreso Argentino de Virología (CAV); 2017

Durante las últimas décadas se ha registrado un resurgimiento a nivel mundial de patógenos virales transmitidos por artrópodos (arbovirus), particularmente de aquellos transmitidos por mosquitos. En particular, el género Alphavirus presenta gran importancia epidemiológica ya que sus miembros pueden ser causantes de importantes enfermedades, tanto en el hombre como en animales domésticos. En este trabajo exploramos el papel del citoesqueleto de la célula hospedadora en la replicación del virus Pixuna (PIXV), un miembro enzoótico del complejo antigénico Encefalitis Equina Venezolana, perteneciente a los Alphavirus del Nuevo Mundo. En primer lugar realizamos la curva de crecimiento en células Vero, en la que pudimos describir una fase de eclipse de 4 h. de duración, seguida por una fase exponencial de 20 h. Mediante inmunofluorescencia y análisis de western blot demostramos un aumento progresivo de las proteínas virales en función del tiempo. A su vez, las células infectadas con el PIXV mostraron severos cambios morfológicos (efecto citopático) debido a modificaciones estructurales en los microfilamentos de actina (MFs) y en los microtúbulos (MTs). Con el objetivo de indagar la participación del citoesqueleto en la replicación viral, utilizamos agentes que alteran la arquitectura y la dinámica de MFs (citochalasina, D jasplakionoline y MTs (nocodazole y paclitaxel). El tratamiento con paclitaxel o nocodazol disminuyó significativamente los títulos virales extracelulares, debido a alteración en la dinámica en la red de MTs. Curiosamente, un citoesqueleto de actina laxo, provocado por el tratamiento con citochalasina D durante la etapa temprana del ciclo de replicación, aumentó significativamente los títulos virales extracelulares. Además, la estabilización de la red de actina con jasplakinolide no tuvo efecto sobre la producción viral. El conjunto de resultados demuestran, por un lado, que es necesario MTs dinámicos para una producción viral eficiente, y por otro, que los MFs cumplen un rol primordial en el proceso de internalización del PIXV, en el cual una red de actina flexible y dinámica favorecería la entrada de los viriones a la célula hospedadora. Entender la relación del PIXV con el citoesqueleto de la célula hospedadora proporciona no sólo un conocimiento valioso sobre la biología celular de esta infección viral, sino que también podría explicar algunas de las propiedades patogénicas de los virus del complejo antigénico de EEV.