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Introducción: Actualmente, la administración tópica de fármacos en la superficie ocular es la vía más deseable para el tratamiento de enfermedades oculares. Sin embargo, la rápida pérdida precorneal, junto a la pobre permeabilidad de las formas farmacéuticas tradicionales a través de la córnea, limitan significativamente la efectividad de ese tipo de terapias. Gracias a la colaboración internacional de nuestro grupo de trabajo con la Planta Piloto de Ingeniería Química (PlaPiQui) de Bahía Blanca (Argentina), estamos desarrollando unos sistemas biopolímericos, en forma de película (films), para liberar fármacos de forma más eficaz y controlada sobre la superficie ocular. El objetivo de este estudio fue, pues, determinar la biocompatibilidad de los films desarrollados a partir de ácido hialurónico (AH) y ácido itacónico (AI) como materiales base con células de la superficie ocular. Material y métodos: Se prepararon dos tipos de films según el agente entrecruzante utilizado: uno usando glutaraldehído (GTA) y otro usando polietilenglicol diglicidil éter (PEGDE). Además, se preparó un tercer film como control usando sólo AH. Para la preparación de los films se disolvió AH y AI en agua bi-destilada. Tras 24h de agitación se incorporó el agente entrecruzante, manteniendo la agitación otras 24h. Posteriormente, se colocó la mezcla sobre una superficie plana y se dejó secar hasta la obtención del film. Se estudió su morfología mediante microscopía electrónica de barrido (SEM). Además, se midió el pH de los medios de cultivo puestos en contacto con los distintos films. Para realizar los estudios de tolerancia in vitro se utilizó la línea de células epiteliales de córnea humana HCE (Araki-Sasaki et al.,1995), mantenida con medio de cultivo DMEM/F12 suplementado. Para ver los efectos de los films sobre las células se realizaron 3 ensayos diferentes: Ensayo de citotoxicidad (XTT): se plantaron 10.000 células/pocillo en placas de 96. Cuando alcanzaron el nivel de confluencia óptimo, se expusieron al contacto de los diferentes films durante 24h. Se añadió una solución de cloruro de benzalconio al 0.01% durante 5 min como control de toxicidad. Posteriormente, se retiró el medio y los films que estaban en contacto con las células, se lavaron con PBS estéril, se incubaron con el kit de XTT en medio sin rojo fenol durante 17h a 37ºC en oscuridad y, para finalizar, se midió la absorbancia una longitud de onda de 450nm; como medida de referencia se usaron 620nm. Ensayo de proliferación (Alamar Blue): para este tipo de ensayo se plantaron 40.000 células/pocillo en placas de 24. Después de 24h se reemplazó el medio por otro sin ningún tipo de suplemento durante otras 24h. Una vez trascurrido este tiempo, se pusieron los diferentes films sobre las células 24h más. Para este ensayo se retiró el medio y los films y se añadió el reactivo Alamar Blue al 10% en medio puro durante 4h a 37ºC. Se recogió el medio con el reactivo y se midió la fluorescencia a una longitud de onda de excitación de 560nm y una emisión de 590nm. Este proceso se repitió a las 48h. Ensayo de inflamación: la posible inducción de inflamación producida por los films en las células de la superficie ocular se evaluó mediante la técnica de ELISA, midiendo los niveles de la interluquina 6 (IL-6). Se ha demostrado que los niveles de IL-6 están aumentados en condiciones inflamatorias. Para la evaluación se recogieron los sobrenadantes de las células en contacto con los films y de las células en contacto con la citoquina TNFα durante 24h, que nos sirvió como control positivo de inducción de inflamación (aumento en la producción de IL-6). Resultados: Todos los films mostraron poros de diferentes tamaños en las imágenes de SEM. El pH del medio de cultivo en contacto con los films se mantuvo constante durante todos los experimentos, sin observarse alteraciones significativas respecto al pH del medio control. Se observó un aumento de la citotoxicidad y una disminución en la proliferación en las células expuestas a los films entrecruzados con GTA, mientras que en las células expuestas a los films entrecruzados con PEGDE y/o en los films control no se observó toxicidad y la proliferación fue similar a la de las células control. No se observó un aumento en los niveles de IL-6, con respecto al control estimulado con TNFα, en las células expuestas a los diferentes films. Conclusiones: La formulación de AH-AI entrecruzado con PEGDE tiene buenas características en cuanto a la biocompatibilidad con la línea celular de córnea humana HCE, por lo que este sistema podría utilizarse como un buen vehículo de fármacos en forma tópica para las células de la superficie ocular.