Sistema neuronal GABAergico en linfocitos humanos

DIONISIO, LEONARDO; DE ROSA, MAR¨ªA JOS¨¦; BOUZAT, CECILIA; ESANDI, MAR¨ªA DEL CARMEN

Bah¨ªa Blanca

Jornada; Primeras Jornadas Bioqu¨ªmicas del Sudoeste Bonaerense. ¡°Desde lo molecular a la cl¨ªnica¡± Universidad Nacional del Sud.; 2009

El ¨¢cido ¦Ã-amino but¨ªrico (GABA) es el neurotransmisor inhibitorio m¨¢s importante en Sistema Nervioso Central. Sin embargo su presencia ha sido identificada en c¨¦lulas no neuronales, como las del sistema inmune. Objetivos: Estudiar el rol del sistema GABA¨¦rgico en la respuesta inmune. Determinar los componentes de este sistema y su funcionalidad en linfocitos humanos. M¨¦todos: Aislamiento de linfocitos de sangre perif¨¦rica, detecci¨®n de ARNm por RT-PCR y PCR en tiempo real. Recaptaci¨®n de [3H]GABA, ensayo de proliferaci¨®n por incorporaci¨®n de [3H]Timidina, inmunocitoqu¨ªmica y registros de corrientes macrosc¨®picas por Patch Clamp. Resultados: En linfocitos activados con el mit¨®geno fitohemaglutinina (PHA) y sin activar, determinamos la expresi¨®n del ARNm de componentes del sistema GABA¨¦rgico como: i) GAD67, isoforma de la enzima ¨¢cido glut¨¢mico descarboxilasa (GAD), sintetizadora de GABA; ii) VIAAT, prote¨ªna vesicular  encargada del almacenamiento de GABA; iii) GAT1 y GAT2, transportadores de GABA; iv) GABA-Transaminasa, enzima catabolizadora de GABA; v) ¦Á1, ¦Á3 y ¦Á6, subunidades del receptor GABAA y vi) ¦Ñ2, subunidad del receptor GABAC. Nuestros resultados demostraron que los transportadores de GABA son funcionales, observ¨¢ndose un incremento de 5 veces en la recaptaci¨®n de [3H]GABA en las c¨¦lulas activadas respecto a las no activadas. Tambi¨¦n determinamos que los receptores ionotr¨®picos de GABA son funcionales ya que agonistas como GABA y muscimol, fueron capaces de generar corrientes macrosc¨®picas en estas c¨¦lulas. Finalmente, determinamos que GABA y muscimol inhiben la respuesta proliferativa de los linfocitos inducida por PHA. Conclusiones: Nuestros resultados demuestran que los linfocitos poseen los elementos necesarios para constituir un sistema GABA¨¦rgico propio. La modulaci¨®n farmacol¨®gica de este sistema puede ser de utilidad en la instauraci¨®n de nuevas estrategias para la regulaci¨®n de la respuesta inmune. Por otro lado, nuestro estudio abre la posibilidad de utilizar los linfocitos como modelo de f¨¢cil accesibilidad para investigar alteraciones del sistema GABA¨¦rgico en enfermedades neurol¨®gicas.