EFECTO DEL ENVEJECIMIENTO EN LA METABOLIZACIÓN DE 2-ARAQUIDONOILGLICEROL Y ARAQUIDONOILETANOLAMIDA EN SINAPTOSOMAS DE CORTEZA CEREBRAL DE RATA.

GAVEGLIO VL; GIUSTO NM; PASQUARÉ SJ

Mar del Plata, Prov. de Bs.As., Argentina

Congreso; Sociedad Argentina de Investigación Clínica SAIC 2009; 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica SAIC

El 2-araquidonoilglicerol (2-AG) y la araquidonoiletanolamida (AEA), son moléculas lipofílicas que actúan como neuromoduladores. El 2-AG es degradado enzimáticamente por la monoacilglicérido lipasa (MAGL) y la AEA por la ácido graso amido hidrolasa (FAAH). Hemos caracterizado la actividad de MAGL y FAAH en sistema nervioso central (SNC) de ratas adultas (SAIC, 2007 y 2008). El objetivo del presente trabajo fue evaluar las actividades MAGL y FAAH en el envejecimiento fisiológico y el rol de agonistas colinérgicos en este proceso. Para ello se trabajó con sinaptosomas provenientes de corteza cerebral (CC) de ratas adultas (4 meses) y seniles (28 meses). Los sinaptosomas fueron obtenidos por centrifugación diferencial y purificados por gradiente de ficoll. Las actividades de MAGL y FAAH se ensayaron empleando como sustratos 2-araquidonil[3H]glicerol y araquidonoil[3H]etanolamina, respectivamente. La reacción enzimática se frenó con el agregado de cloroformo:metanol (1:1).Los productos  [3H]glicerol y [3H]etanolamina fueron cuantificados a partir de la fase acuosa y los sustratos sin reaccionar fueron separados por cromatografía en capa fina y a partir de allí cuantificados.  El empleo de URB-602, inhibidor específico de MAGL, inhibió la actividad enzimática (24%). URB-597, inhibidor específico de FAAH, inhibió la actividad de esta enzima (75%) en sinaptosomas controles. En el envejecimiento se observó un estímulo del 100% y del 55% a nivel de MAGL, empleando como sustratos 2-AG y MAG, respectivamente. La actividad de FAAH se vio disminuida en un 54%. En presencia de carbamilcolina (0.6mM) la actividad MAGL disminuyó en sinaptosomas adultos y aumentó en seniles en un porcentaje similar (25%). Por otro lado la actividad de FAAH disminuyó en sinaptosomas adultos (51%) y seniles (70%). Los resultados muestran una regulación diferencial en la metabolización de 2-AG y AEA por el envejecimiento y por modulación colinérgica.