Las metaloproteinasas son esenciales para la migración de las células gliales de Müller inducida por esfingosina-1- fosfato

SIMON MV; PRADO SPALM F.H.; VERA M; ROTSTEIN N.P.

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LX Reunión Anual SAIC; 2015

SAIC-SAFIS

Las metaloproteinasas son esenciales para la migración de las células gliales de Müller inducida por esfingosina-1- fosfatoM. Victoria Simón, Facundo H. Prado Spalm, Marcela Vera, y Nora P. Rotstein. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca, UNS-CONICET, Bahía Blanca, Buenos Aires.Las células gliales de Müller (CGM) son el principal tipo glial en la retina. Distintos daños a la retina inducen su activación, originando la ?gliosis? reactiva, cuya proliferación y migración anormales son claves en el desarrollo de las enfermedades proliferativas de la retina. Poco se sabe sobre los mecanismos que regulan estos procesos. Recientemente determinamos que la esfingosina-1- fosfato (S1P), un esfingolípido bioactivo, promueve la migración de las CGM. Investigamos ahora las vías de señalización activadas por la S1P y si las metaloproteinasas, enzimas involucradas en la migración celular, median la migración glial inducida por S1P.Cultivos puros de CGM de retina de rata se sometieron al ensayo de cicatriz y luego se suplementaron o no con W146 (10 µM) o BML-241 (10 µM), antagonistas de los receptores de membrana para S1P (S1PR) 1 y 3, respectivamente; LY294002 (50 µM), U0126 (10 µM) y SB203580 (1 µM), inhibidores de las vías de la PI3K, ERK/ MAPK y p38 MAPK, respectivamente; o TIMP-1 (300 ng/ml), pan inhibidor de las metaloproteinasas. Se incubaron después con S1P 5 µM, analizando la migración glial luego de 17 hs. Los cultivos suplementados con S1P mostraron una marcada migración de las CGM. El agregado de BML-241 disminuyó marcadamente la migración glial, tanto en cultivos controles como tratados con S1P, mientras que el W146 no afectó dicha migración. La pre-incubación con LY294002 o U0126 redujo en más de 60% la migración glial inducida por S1P, mientras que la disminución con SB203580 no fue significativa. El pre-tratamiento con TIMP-1 prácticamente bloqueó la migración de las CGM, inducida con S1P, reduciéndola a la observada en los controles. Nuestros resultados indican que la S1P activa al S1PR3 y las vías de señalización PI3K y ERK/MAPK para estimular la migración glial. También sugieren que las metaloproteinasas son esenciales en este proceso y que la S1P regularía su activación o su expresión para promover la migración glial.