Activación de vías de metabolización por estrés oxidativo en sistema nervioso central

URANGA, R.M., MATEOS, M.V., GIUSTO, N.M. Y SALVADOR

Mar del Plata

Congreso; LII reunion anual de SAIC; 2007

Sociedad Argentina de Investigación Clìnica

ACTIVACIÓN DE VÍAS DE SEÑALIZACIÓN LIPÍDICA POR ESTRÉS OXIDATIVO EN SISTEMA NERVIOSO CENTRAL. Uranga, RM; Mateos MV., Giusto, NM., Salvador,GA. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. UNS-CONICET salvador@criba.edu.ar Los metales de transición, son considerados agentes neurotóxicos ya que  producen peroxidación lipídica, daños en el funcionamiento  mitocondrial y disminución de la actividad de los transportadores de glucosa y glutamato. Estos efectos se asemejan al daño que sufren las neuronas expuestas  al péptido β-amiloide en la enfermedad de Alzheimer. El objetivo de este trabajo fue evaluar la participación de vías de señalización lipídica en los mecanismos de injuria oxidativa en terminales sinápticas de corteza cerebral expuestas a FeSO4 (50 uM). Usando sinaptosomas preincubados en condiciones control y en presencia de Fe2+ se determinó la actividad de la fosfolipasa D (PLD), de la  fosfolipasa C (PLC) y de la fosfatidilinositol 3-quinasa (PI3K). La actividad de la PLD y de la PLC se evaluó usando [14C]fosfatidilcolina (PC) exógena como sustrato. La actividad de la PI3K se midió en sistema entero y en inmunoprecipitados utilizando [γ 32P]ATP. A los 5 min de exposición al insulto oxidativo se observó una disminución en la actividad mitocondrial con respecto a las condiciones control; dicha disfunción se acentuó a mayores tiempos de incubación (30 y 60 min). La generación de diacilglicerol (DAG) a partir de PC  se incrementó a los 5, 30 y 60 min de exposición al Fe2+. Tanto la generación de DAG en presencia de etanol como la de fosfatidiletanol,  marcador de la actividad  PLD, estuvieron estimuladas  por efecto del ión metálico. Además la actividad de la PI3K y de su quinasa efectora, Akt,  fueron  estimuladas a los 5 min de exposición a la injuria oxidativa. Ensayos realizados con LY294002 , inhibidor de PI3K, no afectaron el incremento de los niveles de DAG generados por el Fe2+ . Nuestros resultados indican que las vías de transducción lipídica que generan DAG a partir de PC y fosfatidilinositol 3´ fosfatos se encuentran activadas durante la injuria oxidativa en terminales sinápticas de corteza cerebral de rata.