El ácido retinoico induce apoptosis y diferenciación en neuronas fotorreceptoras de retina activando la vía de la P38/MAPK

POLITI L. E..; DE GENARO P. A.; SIMÓN M.V.; ROTSTEIN N. P.

Buenos Aires

Congreso; IX Congreso Nacional de Investigación en Visión y Oftalmología, Asociación de Investigación en Visión y Oftalmología (AIVO); 2012

Objetivo: el Ácido Retinoico (AR) juega un rol crucial en la diferenciación de distintos tejidos y es crítico durante el desarrollo del sistema nervioso, incluyendo la retina. Además, se ha mostrado que induce apoptosis en distintos tipos celulares. No se conocen con certeza los mecanismos por los cuales el AR induce estos efectos antagónicos. En este trabajo analizamos los efectos del AR y los mecanismos que activa en neuronas de retina. Métodos: cultivos neuronales de retina de rata se trataron con AR al día 0 y al día 2, y se analizó el efecto del pre-tratamiento con o sin ácido docosahexaenoico (ADH), un factor de supervivencia para FRs y Z-VAD-FMK, un pan inhibidor de caspasas. A distintos tiempos se evaluaron parámetros de diferenciación y apoptosis. Para establecer si el AR activa la vía de p38/MAPK, se analizaron los niveles P-p38 en cultivos sin y con AR, y los efectos del agregado de SB203580, inhibidor específico de p38, mediante inmunocitoquímica y western blot. Resultados: El agregado de AR a día 0, cuando los progenitores de FRs permanecen en el ciclo celular, incrementó la apoptosis de los FRs; esto no ocurrió cuando fue agregado al día 2, cuando los progenitores ya han salido del ciclo. El tratamiento con Z-VAD-FMK impidió la apoptosis inducida por AR. El AR incrementó selectivamente la expresión de opsina y periferina en los FRs, independientemente del momento de su agregado, y estimuló el crecimiento axonal en FRs y células amacrinas. El AR estimuló la rápida fosforilación de p38, mientras que el SB203580 bloqueó los efectos del AR en la expresión de opsina y apoptosis, sin alterar el crecimiento axonal. Notablemente, la suplementación de  los cultivos con ADH previno la apoptosis inducida por el AR. Conclusiones: El AR promovió la diferenciación de los FRs a distintos tiempos in vitro, e indujo simultáneamente su apoptosis temprana sólo mientras existieron progenitores en proliferación. El AR activó la vía de  p38-MAPK para estimular diferenciación y apoptosis de los FRs, pero no para promover el crecimiento axonal, lo que sugiere que activaría distintas vías de señalización simultáneamente. La prevención de dicha apoptosis por el ADH sugiere la necesidad de una estricta coordinación de los factores de diferenciación, como el AR y supervivencia, como el ADH, para preservar el número adecuado de FRs durante el desarrollo de la retina.   Subsidios: FONCYT, CONICET y UNS