Interacción entre las células gliales de Müller y neuronas fotorreceptoras en ratones portadores de una degeneración retiniana

VOLONTÉ, Y.; SIMÓN, M.V.; GERMAN, O.L.; ROTSTEIN, N.P.; POLITI, L.E.

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; IX Congreso Nacional de Investigación en Visión y Oftalmología, Asociación de Investigación en Visión y Oftalmología (AIVO); 2012

Asociación de Investigación en Visión y Oftalmología (AIVO)

Objetivos: las enfermedades neurodegenerativas  de la retina como la retinitis pigmentosa se caracterizan por la pérdida progresiva e irreversible de neuronas fotorreceptoras. Para investigar las causas y posibles tratamientos para esta enfermedad resulta útil contar con un modelo animal donde los fotorreceptores (FRs) sean afectados por un proceso degenerativo  similar al que ocurre en esta enfermedad, como los ratones “rd”. Estudios previos de varios laboratorios incluyendo el nuestro, demuestran el rol de las células gliales de Müller (CGM) en la supervivencia y desarrollo de los FRs. Recientemente establecimos que las CGM inducen la transformación de células progenitoras de retina en células madre multipotentes, las cuales pueden luego diferenciarse como FRs, sugiriendo que las CGM podrían contribuir a regenerar los FRs en los procesos degenerativos de la retina. Si bien se han estudiado intensivamente las causas de la retinitis pigmentosa, el rol de las células gliales, y sus posibles alteraciones en esta patología están aún inexplorados. Investigamos ahora el desarrollo de las CGM de ratones “rd” y sus interacciones con los FRs de retina. Métodos: utilizamos cultivos mixtos neuro-gliales obtenidos de retinas de ratones “rd” de 2 días. Los cultivos fueron fijados a distintos tiempos del desarrollo y analizados para determinar la muerte de los FRs, utilizando la sonda nuclear DAPI, y la progresión en el ciclo celular, midiendo la incorporación de Br deoxi-uridina (BrdU)  y la expresión del filamento intermedio nestina como marcador de células madre multipotentes. Resultados: las CGM proliferaron activamente, incorporando BrdU en forma aparentemente normal. Sin embargo, mientras en CGM de retina de rata la expresión de nestina se mantiene homogénea durante tiempos prolongados en cultivo, en GGM de retinas rd dicha expresión no fue homogénea y en muchos casos perdió su patrón filamentoso. El cocultivo con CGM no logró evitar la apoptosis neuronal: el porcentaje de FRs “rd” apoptóticos aumentó progresivamente desde un 5% a un 50% entre los días 8 y 16, en forma similar a lo que ocurre en la retina in vivo. Conclusiones: nuestros resultados preliminares sugieren que además de los defectos ya demostrados para los FRs en ratones “rd”, las CGM podrían presentar alteraciones que influirían en la muerte de los FRs. Subsidios: FONCYT, CONICET y UNS