La melatonina activa mecanismos de señalizacion intracelulares en los fotorreceptores in vitro como protección frente al daño oxidativo

MONACO, S.; GERMAN, O.L.; ROSESTEIN, R.; ROTSTEIN, N.; POLITI, L.E.

Buenos Aires

Congreso; VIII Congreso Anual de la Asociación de Visión y Oftalmología (AIVO); 2011

Objetivos: En muchas enfermedades neurodegenerativas de la retina, los fotorreceptores (FR) degeneran por apoptosis. El daño oxidativo participaría en la activación de la apoptosis; es importante entonces identificar moléculas y mecanismos que protejan a los FR de dicho daño. Por su potente acción antioxidante la melatonina (Mel) ha sido propuesta como factor de protección ante el daño oxidativo. Previamente demostramos que en ausencia de factores de protección, los FRs desarrollan apoptosis durante el desarrollo in vitro, o ante el daño oxidativo inducido con H2O2., y que la Mel protege a los FR  de la apoptosis y promueve su diferenciación. Investigamos ahora qué vías activaría para ejercer estos efectos. Materiales y Métodos: cultivos neuronales de retina de rata se suplementaron al día 0 con o sin 40nM Mel, y se trataron a día 3 con 10mM H2O2, o se mantuvieron por 6 días in vitro. Para analizar si la Mel activaba la vía de las ERK/MAPK o la de PI3K/Akt se agregaron los  inhibidores específicos U0126 o LY294002, respectivamente, previo al agregado de Mel. La apoptosis se determinó por ensayo de TUNEL; la formación de ROS con la sonda DFCA y la actividad de la enzima glutatión peroxidasa (GPx) con un kit específico. Resultados: La Mel disminuyó el porcentaje de FR apoptóticos y  la formación de ROS en 15% y 40%, respectivamente, respecto a los controles. El tratamiento con H2O2 aumentó la apoptosis y la formación de ROS en los cultivos, mientras que el agregado de Mel  preservó estos parámetros en valores cercanos a los de los controles. Además, la Mel produjo un aumento significativo en la actividad de GPx frente al tratamiento con H2O2. El agregado de U0126, pero no de LY294002, inhibió el efecto antiapoptótico de Mel. Conclusiones: estos resultados sugieren que la Mel ejercería un efecto de protección dual, actuando como antioxidante y activando la vía de señalización de la ERK/MAPK para promover la supervivencia de los FR.