Optimization of different methods and strategies for the regeneration of an electrochemical immunosensor

BARRAZA DANIELA E.; MADRID, ROSSANA E.; PUERTAS YANINA E.

Piriapolis

Congreso; 22 Congreso de Bioingeniería y II Jornadas de Ingeniería Clínica; 2020

Resumen? Este trabajo tiene como objetivo optimizar el sistema de detección de antígeno-anticuerpo funcionalizado en unbiosensor para detectar plantas transgénicas mediante el uso de la proteína pura NPTII (neomicina fosfotransferasa II) comoantígeno, que fue purificado por el grupo de ITANOA (CONICET) y el Experimento Agroindustrial Experimental Estación"Obispo Colombres" (EEAOC) de Tucumán.La optimización se realizó en electrodos de oro biofuncionalizados para la inmovilización de los anticuerpos específicos,considerando esta etapa decisiva en términos de especificidad, sensibilidad, reproducibilidad y estabilidad del inmunosensor. Secaracterizó la respuesta electroquímica de este biosensor de afinidad, y se evaluaron diferentes estrategias para su regeneración yreutilización en el laboratorio. Para lograr esta regeneración, fue necesario separar el antígeno del anticuerpo después de lareacción, para permitir que el biosensor esté disponible nuevamente para una nueva detección. Esta disociación tiene comorequisito crucial, retener la actividad y especificidad máximas de los anticuerpos y / o antígenos inmovilizados después de laseparación.La inmovilización adecuada se logró mediante el método de reticulación (PEI-GA), y fue posible disociar los antígenos de losanticuerpos inmovilizados (Anti NPTII). Para lograr esto, se utilizó el agente de disociación compuesto por una mezcla de glicina,ácido clorhídrico y dimetilsulfóxido a pH: 2.3, lo que permitió la correcta regeneración del biosensor.