Screening sobre la actividad biológica de beta-carbolinas comerciales sobre cepas de Candida aisladas de pacientes con Candidosis vulvovaginal

COLOMBRES, M.S.; ÁLVAREZ, C.; CASTILLO, N.; OLMEDO, G.; VAN GELDEREN, A.; CABRERIZO, F.M.; VIZOSO PINTO, M. G.

Ciudad Autónoma de Bs As

Congreso; XIII Congreso Argentino de Micología; 2014

Asoc. Argentina de Microbiología y Asociación Micológica Carlos Spegazzini

La candidosis vulvovaginal es una enfermedad ampliamente distribuida y que afecta a una gran proporción de mujeres sanas. Algunas sufren formas recurrentes, lo cual afecta su calidad de vida. Las consultas reiteradas representan pérdidas económicas para el sistema de salud. Por otra parte, existe un elevado n° de pacientes que se autoprescriben con antifúngicos, provocando aumento en la selección de cepas resistentes. Las -carbolinas (Cs) representan a una familia de alcaloides que se encuentran en innumerables sistemas biológicos. Se evaluó el efecto de 6 Cs comerciales sobre el crecimiento y la capacidad de inhibir la formación de biofilm de Candida albicans, C. glabrata y C. parapsilosis aisladas de vaginitis y sobre una cepa de referencia intrínsecamente resistente a Fluconazol: C. krusei ATCC6258. El objetivo fue determinar si alguna de las Cs podrían ser de utilidad en el tratamiento local de candidosis. Tres cepas de Candida fueron aisladas de vulvovaginitis e identificadas por técnicas micológicas convencionales. La capacidad de las Cs (norHarmano, Harmano, Harmol, Harmalol, Harmina y Harmalina) para inhibir el crecimiento de las cepas de Candida fue determinada usando diluciones seriadas (concentraciones desde 62,5 a 1000 µM) en medio Sabouraud para determinar las concentraciones inhibitorias mínimas de cada una. Se seleccionaron las Cs con actividad inhibitoria y se evaluó, posteriormente, su efecto sobre la capacidad de formación de biofilm. Para ello, se sembraron 1x107 cel/ml en pocillos de policubeta, las cuales se incubaron a 37°C durante 1,5 h (fase de adhesión). Luego, se lavaron los pocillos para eliminar las células no adheridas y se agregó Sabouraud fresco continuando con la incubación. Se registró la formación del biofilm después de 20 hs poniéndolo en evidencia con solución de cristal violeta. Se efectuaron lecturas cuantitativas derivadas de medidas de la DO595nm. Tres de las 6 Cs testeadas (norHarmano, Harmol, Harmina) tuvieron efecto inhibitorio sobre el crecimiento de las cepas de Candida tal como lo evidencia las CIM presentadas. Las diferentes Cs presentaron distintos comportamientos sobre el biofilm antes y después de la fase de adhesión. La formación de biofilm antes de la fase de adhesión fue inhibida por los siguientes compuestos: NorHarmano a C. albicans y C. krusei; Harmol a C. albicans y Harmina a C. krusei. Cuando las sustancias fueron agregadas después de la fase de adhesión, NorHarmano inhibió la formación de biofilm de C. glabrata y C. krusei, Harmol de C. krusei y Harmina de C. glabrata y C. krusei. Por lo tanto, el efecto de estas sustancias sobre la formación de biofilm dependió de la cepa, de la sustancia en sí misma y del tiempo en el cual se la adicionó (durante o después de la fase de adhesión). En conclusión, las Cs representan un grupo de pequeñas moléculas que podrían ser utilizados como antifúngicos. Se planea continuar y profundizar los ensayos para caracterizar su actividad.