Detección molecular de los agentes causales de roya en caña de azúcar

BERTANI, R.P.; PERERA, F.; FUNES, C.; KAIRUZ, C.; ARIAS, M.; GONZALEZ, V.; PLOPER, L.D.; CASTAGNARO, A.P.

Mar del Plata

Congreso; 2º Congreso Argentino de Fitopatología; 2011

Asociación Argentina de Fitopatólogos

La roya marrón (Puccinia melanocephala), presente en Tucumán desde 1988; y la roya naranja (P. kuehnii), aún no reportada en la Argentina, pueden ocasionar pérdidas en el rendimiento de la caña de azúcar. Dado que la observación visual a campo dificulta la diferenciación de ambas patologías, y siendo la roya naranja una amenaza potencial para la agroindustria cañera, es imprescindible disponer de técnicas de diagnóstico precisas y específicas. El objetivo fue optimizar metodologías basadas en PCR, para el diagnóstico de ambos patógenos. Se colectaron 30 muestras de hojas jóvenes con síntomas de roya. Se realizó la extracción de ácidos nucleicos, ajustando el tipo de muestra, con la técnica de CTAB modificada con y sin limpieza adicional con fenol. La detección molecular se basó en la amplificación de diferentes fragmentos del ADN ribosomal (ADNr) mediante el empleo de cinco pares de cebadores: dos generales para hongos (ITS1F/ITS4, NL1/NL4); uno para diferenciar ambos patógenos (PkPmF/PkPmR); uno específico para P. melanocephala (Pm1F/Pm1R) y otro para P. kuehnii (PkPmF/Pk1R). Las muestras analizadas resultaron positivas para P. melanocephala, amplificando fragmentos de 670 pb (ITS1F/ITS4), 608 pb (NL1/NL4), 585 pb (PkPmF/PkPmR) y 480 pb (Pm1F/Pm1R). No se observaron bandas de 527 pb cuando se empleó el par PkPmF/Pk1R, específico para P. kuehnii. La EEAOC pone a disposición del sector cañero esta metodología para el diagnóstico de ambas patógenos.