EXPRESIÓN DEL RECEPTOR DEL ACTIVADOR DEL PLASMINÓGENO TIPO UROQUINASA Y SU LIGANDO EN EL OVIDUCTO BOVINO

GARCÍA D.; ROLDÁN OLARTE, M; .MICELI, D C

Tafi del Valle, Tucumán

Jornada; XXVII Jornadas Científicas de la Asociación de Biología de Tucumán; 2010

Asociación de Biología de Tucumán

El activador de plasminógeno tipo uroquinasa (u-PA) es una serinoproteasa que convierte el plasminógeno en una enzima activa, plasmina, importante en la remodelación de la matriz extracelular. La interacción de u-PA con su receptor (u-PAR), permite localizar su actividad proteolítica en las proximidades de las células y activar vías de señalización intracelular. Debido a que en estudios previos hemos detectado la presencia de u-PAR en el oviducto bovino, el objetivo de este trabajo fue estudiar su expresión en las células del epitelio durante el ciclo estral y analizar la localización de dicha proteína. Además se propuso examinar la expresión de su ligando, u-PA en las mismas muestras. Se obtuvieron oviductos de vacas faenadas, se clasificaron en las diferentes etapas del ciclo estral de acuerdo a la morfología del ovario y se separaron las regiones del ámpula e istmo. De ellas se obtuvieron células del epitelio oviducal que se destinaron a la extracción de ARN total y RT-PCR semicuantitativa. Un segmento representativo de cada muestra se fijó en formaldehído 4%-PBS y se sometió a técnicas de histología de rutina. Para el análisis mediante inmunohistoquímica indirecta se utilizó un anticuerpo primario policlonal anti u-PAR humano y un anticuerpo secundario marcado con biotina. Se trató con extravidina-peroxidasa y se reveló con DAB-H2O2. Se observó reacción positiva en el epitelio y tejido muscular del oviducto bovino, en las regiones consideradas. La mayor señal fue detectada en el istmo, en la zona apical de células epiteliales, en diestro. El análisis por RT-PCR semicuantitativa permitió demostrar que los genes que codifican a u-PA y u-PAR, co-expresan en las células epiteliales del oviducto bovino en todas las etapas del ciclo estral. Sin embargo mediante la metodología empleada no se observaron diferencias significativas. La presencia del receptor en las células epiteliales, permitiría la unión de u-PA presente en el fluido oviducal, llevando a cabo la activación del plasminógeno en la superficie del epitelio y la transducción de señales intracelulares que favorezcan la síntesis y secreción de moléculas implicadas en el funcionamiento del oviducto.