IDENTIFICACION DE MACROMOLECULAS

DORA C. MICELI Y MARIA JIMENEZ DÍAZ

CONCEPTOS TEORICOS Y PRACTICOS PARA EL ESTUDIO DE CELULAS Y BIOMOLECULAS

Universidad Nacional de tucumán

Lugar: Tucumán; Año: 2008; p. 121 - 136

 IDENTIFICACIÓN DE MACROMOLÉCULAS Do r a Cr i s t i n a Mice l iMa r í a Jimé n e z Dí a zMétodos inmunocitoquímicosEstos métodos constituyen una de las herramientas más utilizadas en Biología Celular, especialmente cuan-do se  intenta  identiicar y/o  localizar moléculas en  las células. La unión entre un antígeno y su anticuerpo (in-teracción  epitope-paratope)  se  realiza mediante  unio-nes no covalentes relativamente débiles, pero con una alta especiicidad. De esta manera, si el anticuerpo (Ac) dirigido contra una determinada proteína o constituyen-te de la estructura celular, es conjugado con moléculas luorescentes,  enzimáticas,  radioisótopos  o  partículas (oro coloidal,  látex, etc.), se constituye en un  “marca-dor” de la presencia, o no, de la molécula contra la cual está dirigido. Es posible la observación de éstas con el microscopio óptico o con el microscopio electrónico, de-pendiendo del procesamiento del material y la inalidad del estudio.Inmunocitoquímica  directa: •    se  llama  así  a  la técnica  en  la  que  el  anticuerpo  primario,  el  que se une al antígeno, está conjugado con moléculas luorescentes o enzimas.Inmunocitoquímica  indirecta: •   en este  caso, el Ac primario no está marcado. Un segundo Ac di-2rigido contra el Ac primario (inmunoglobulina anti-anticuerpo) está marcado y permite visualizar el complejo de Ag-Ac-Ac.