Cambios de GP de laurdan en eritrocitos tratados con HlyA no se correlacionan con la susceptibilidad a la toxina

VANESA HERLAX; SUSANA SANCHEZ; SABINA MATÉ; LAURA BAKÁS

LaPlata

Congreso; Reunion anual SAB; 2008

SAB

Alfa hemolisina (HlyA), miembro representativo de la familia de toxinas RTX (Repeat in toxin), es una toxina proteica que ciertas cepas patógenas de E.coli secretan específicamente al medio. Está demostrado que la toxina es un factor importante de virulencia en enfermedades extraintestinales como infecciones urinarias, meningitis y septicemia.      El mecanismo preciso por el cual HlyA mata a las células in vivo no están dilucidado. Esta toxina presenta un amplio espectro respecto a las células blanco, atacando células de varios tipos como fibroblastos, células endoteliales, granulocitos, monocitos, macrófagos y eritrocitos de diferentes especies. La existencia de un receptor para HlyA en las membranas de las células diana es el punto de mayor controversia hasta la fecha. Aunque en membranas lipídicas puras la toxina es activa, se han encontrado receptores en las membranas de algunas células blanco, como por ejemplo glicoforina en eritrocitos. Recientemente, Valeva et al  demostraron que HlyA no necesita de un receptor para lisar eritrocitos. Si bien estos resultados parecerían contradecir los anteriores, no es así, ya que en este trabajo utilizaron eritrocitos de conejo y éstos carecen de glicoforina. Por otro lado, resultados de nuestro laboratorio empleando bicapas planas de diferente composición lipídica están a favor de la formación de un poro proteolipídico, como estructura causante de la lisis celular      En este trabajo nos planteamos como objetivo el estudio de los cambios producidos en la membrana como consecuencia de la interacción entre HlyA y eritrocitos de diferentes especies. Se realizaron medidas de Polarización Generalizada del Laurdan (GP) mediante microscopía bifotónica. Las especies de eritrocitos elegidas fueron: caballo, carnero y conejo, por presentar diferencias en la composición lipídica y proteica de sus membranas. Col/SM ¦¤GP=GP c/HlyA- GP control % hemólisis caballo 11/1 -0.03 32 carnero 2/1 0.03 66 conejo 6/1 0.11 45      Los resultados muestran que no existe una correlación entre la susceptibilidad de los eritrocitos y los cambios de GP de laurdan cuando son tratados con la toxina.