Caracterización por ESI-MS de los Triacilglicéridos en Gotas Lipídicas Nucleares

SISTI, MARTÍN SEBASTIÁN; RONCAGLIA, DIANA I.; LAGRUTTA, LUCÍA CAROLINA; VES LOSADA, ANA

Los Cocos, Córdoba

Congreso; Segundo Congreso Argentino de Espectrometría de Masa; 2014

Dentro de la célula eucariota, los lípidos neutros (LN) están asimitricamente distribuidos. Los LN celulares se encuentran dentro de estructuras macromoleculares denominadas golas lipídicas (LD) citosolicas (cLD) o nucleares (nLD). Las LD están formadas por núcleo hidrófobico rico en triacilgliceroles (TAG) y ester de colesterol (CE) rodeado por una monocapa lipoproteica rica en fosfolípidos (PL), proteinas (P) y cholesterol (C). Las LD son un sistema dinámico que estaría involucrado en el delivery celular de lípidos (L) y P, siendo capaces de incorporar y/o aportar de forma rápida L y P. Los lípidos estarían involucrados en: vías de señalización, aportando ligandos (FA) para los factores de transcripción y, serían sustratos del metabolismo lipídico. Hemos determinado que los TAG celulares, están compuestos por cantidades equivalentes de ácidos grasos (FA) saturados (16:0 y 18:0), MUFA (16:1 y 18:1) y PUFA; siendo los principales FA esterificados: 18:1n-9, 18:2n-6 y 16:0. El objetivo fue determinar las especies moleculares (EM) de los TAG celulares. Para lo cual se aislaron cLD y núcleos de hígado de rata. A ambas fracciones celulares se le extrajeron los lípidos mediante la técnica de FOLCH. Los TAG se aislaron por cromatografía en capa fina y posteriormente se les adiciono adicionó acetato de amonio. Los TAG se analizaron por infusión directa, como aductos de amonio [M-NH4]+ por ESI-MS. Los iones moleculares [M-NH4]+de TAG se observaron en una ventana m/z (800 a 950 uma) donde no se superponen con otros lípidos neutros. Las diferentes relaciones m/z de las EM TAG se obtuvieron a partir de los espectros ESI-MS y ESI-MS/MS. Fueron analizadas empleando software adecuados para obtener las posibles combinaciones de cadenas acílicas a partir del número de carbonos y dobles enlaces, teniendo en cuenta la composición de FA totales de TAG. En conclusión, las EM de TAG nucleares (nLD) son comparables a las citosólicas (cLD) y por lo tanto la diferente localización celular determinaría su función.