INFLUENCIA DE CICLOSPORINA Y SIROLIMUS SOBRE LAS ENZIMAS DESATURANTES DE ÁCIDOS GRASOS EN CÉLULAS DE HEPATOMA HUMANO (HEPG2)

LAUSADA N., RAIMONDI JC. TACCONI DE GÓMEZ DUMM IN

Santa Fé

Congreso; IX Congreso Argentino de Trasplantes; 2007

Sociedad Argentina de Trasplantes

INFLUENCIA DE CICLOSPORINA Y SIROLIMUS SOBRE LAS ENZIMAS DESATURANTES DE ÁCIDOS GRASOS  EN CÉLULAS DE HEPATOMA HUMANO (HEPG2) Lausada N.,* Raimondi JC.*, Tacconi de Gómez Dumm IN**. *Laboratorio-Programa de Trasplante de Órganos y Tejidos, **Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plata (INIBIOLP).Facultad de Ciencias Médicas-Universidad Nacional de La Plata. Introducción: Los ácidos grasos (AG) son componentes principales de lípidos complejos. Las enzimas que catalizan la adición de una doble ligadura en una cadena de AG son denominadas desaturasas de AG y poseen un rol crítico en la biosíntesis de AG polinosaturados (PUFAs). Las desaturasas reciben su nombre de acuerdo a la posición en la cual introducen la doble ligadura en la cadena de acil-CoA. En mamíferos se encuentra actividad de D9, D6 y D5 desaturasas. Los AG de la serie n-6 son proinflamatorios mientras que los AG de la serie n-3 son inmunomoduladores. Estos últimos promueven la vasodilatación y reducen la activación endotelial, por lo tanto, se encuentran involucrados en la prevención de eventos vasculares frecuentes postrasplante renal. Aún no es conocido el efecto que producirían las drogas inmunosupresoras ciclosporina A y sirolimus  sobre la regulación de estas enzimas in-vitro como se han evaluado a los esterorides. Objetivos: estudiar la incorporación y trasnformación de AG con marcación radioactiva en una línea de células de hepatoma humano (HepG2) tratada con ciclosporina A (CsA) y sirolimus (SRL). Métodos: se trataron 5 lotes de células HepG2  en cultivo con CsA (1µg/µl y 2 µg/µl) y SRL (10 ng/mL y 20 ng/mL) durante 3 días. Un lote de células sin tratamiento inmunosupresor se utilizó como control. Al cabo de ese lapso se cosecharon las células, se extrajeron los AG los cuales se analizaron por cromatografía-gas-líquido. Posteriormente y con la dosis más elevada de cada uno de los inmunosupresores se repitió el procedimiento adicionando AG marcados: palmítico-[1-14C]; linoleico-[1-14C] o eicosatrienoico-[1-14C] al tercer día de tratamiento inmunosupresor. La transformación de los AG en sus homólogos superiores fue analizada por radiocromatografía. Resultados: la incubación de las células con ambos inmunosupresores produjo una disminución en el porcentaje de AG palmitoleico,  linoleico y araquidónico. El agregado de ácido palmítico radioactivo demostró una disminución de sus homólogos superiores en presencia de los inmunosupresores CsA y SRL dónde actúa la enzima D9 desaturasa (CsA: 0.61±0.01;  SRL: 0.59±0.04 vs Control 0.79±0.05; P<0.01). Contrariamente se observó un aumento significativo en los AG que resultan de la incorporación y metabolismo de sus precursores linoleico (CsA: 0.93±0.04; SRL: 1.02±0.03 vs Control 0.60±0.03; P<0.01) y eicosatrienoico (CsA: 1.12±0.02; SRL: 1.07±0.01 vs Control 0.75±0.01; P<0.01) donde actúan la D6 y D5 desaturasas. Conclusiones: las drogas ciclosporina A y sirolimus provocaron un descenso de la actividad D9 desaturante con un incremento de la actividad de las D6 y D5 desaturasas. Este mecanismo de acción es opuesto al de los esteroides demostrado en la literatura científica, deduciendo que los esteroides afectan en forma más adversa el perfil de AG de lípidos totales de diversas membranas.