Expresión diferencial de genes codificantes de ácido graso reductasas en Triatoma infestans en función del sexo y la resistencia a insecticidas

VALEFF, NATALÍN JIMENA; CALDERÓN FERNÁNDEZ, GUSTAVO M.

Mar del Plata

Congreso; X Congreso de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2014

Sociedad Argentina de Protozoología

La superficie cuticular de Triatoma infestans está cubierta por una mezcla compleja de lípidos, predominando los hidrocarburos y los alcoholes grasos. Estos compuestos tienen un rol fundamental en la supervivencia, fisiología y comportamiento de los insectos, evitando una deshidratación letal, participando como feromonas de contacto intraespecíficas y regulando la penetración de agentes químicos y biológicos. Hemos demostrado anteriormente el rol de los alcoholes grasos (FA) cuticulares en el reconocimiento sexual pero se desconoce si están relacionados con la resistencia a insecticidas. Los FA se forman a partir de ácidos grasos de cadena larga y muy larga producidos por la acción sucesiva de las ácido graso sintasas (FAS) y ácido graso elongasas (ELOVL) del integumento del insecto. Esos ácidos grasos son reducidos a FA de la misma longitud de cadena por ácido graso reductasas (FAR) también específicas del tejido integumentario. El objetivo de este trabajo fue analizar la expresión de los genes codificantes de las FAR del integumento de T. infestans en función del sexo y la resistencia a insecticidas. Se obtuvo RNA total a partir del integumento de machos y hembras y de ejemplares susceptibles y resistentes a insecticidas, y se sintetizó cDNA mediante RT-PCR. Empleando primers específicos diseñados a partir de secuencias parciales de FAR de T. infestans disponibles en nuestro laboratorio se analizó la expresión diferencial de los genes mediante PCR cuantitativa en tiempo real. Asimismo se obtuvo la secuencia completa de una FAR mediante la técnica de RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends). Se obtuvieron diferencias significativas de entre 3 a 20 veces en la expresión de varios genes de FAR de T. infestans tanto en función del sexo como entre insectos susceptibles y resistentes. Se caracterizó la secuencia de una FAR con una identidad aproximada del 56% con secuencias ortólogas de Apis mellifera y otros insectos.