Caracterización molecular de las ácido graso sintasas y acil-CoA elongasas involucradas en la síntesis de lípidos cuticulares en Triatoma infestans.

CALDERÓN G.M; COCCHIARARO BASTÍAS L.; PEDRINI N; JUAREZ M.P

Ciudad de Buenos Aires

Jornada; V Jornadas de Bioquímica y Biología Molecular de Lípidos y Lipoproteínas; 2012

Facultad de Farmacia y Bioquímica de la UBA

Los lípidos cuticulares de Triatoma infestans comprenden principalmente hidrocarburos, alcoholes grasos y ácidos grasos libres o esterificados. Estos lípidos son cruciales para la supervivencia del insecto, regulando la pérdida de agua y la penetración de agentes químicos y biológicos, y participando en la comunicación química como feromonas de contacto. Su biosíntesis tiene lugar en el integumento, mediante la acción concertada de ácido graso sintasas (FASs) y acil-CoA elongasas (ELOVLs). En este trabajo se inició la caracterización molecular de estas enzimas. Para ello, a partir de RNA total purificado del integumento de T. infestans se sintetizó cDNA mediante RT-PCR. Se diseñaron primers degenerados basados en secuencias conocidas de otros insectos, y se usaron para amplificar secuencias parciales de las enzimas de interés mediante PCR. Las secuencias parciales fueron clonadas y secuenciadas para determinar su identidad. Se obtuvieron secuencias parciales de FAS con alta identidad de secuencia con mamíferos (100%) e insectos (60%), y de ELOVL con alta identidad de secuencia con insectos (87%) y mamíferos (60%). Se amplificaron los extremos 5’ y 3’ de una ELOVL tipo 4, obteniendo fragmentos de 300 y 500 bp respectivamente. Se continuarán estos estudios identificando otras secuencias génicas y estudiando la expresión diferencial de estos genes en función del sexo, estadio de desarrollo y susceptibilidad a insecticidas.