Respuesta metabolica global en bilis de O. bonaeriensis (Pisces) expuestos al piretroide cipermetrina, analizadas mediante HPLC-MS

- MARINO D.J., RONCO A.E., CASTRO E.A., CARRIQUIRIBORDE P.

Lima. PERU

Congreso; IX Congreso SETAC Latinoamérica. Society of Environmental Toxicology; 2009

SETAC

El objetivo del trabajo fue evaluar los perfiles metabolicos globales en la bilis de Odontestes bonaerensis expuestos al insecticida piretriode cipermetrina identificando y caracterizando estructuralmente los metabolitos mediante espectrometría de masas combinada con herramientas computacionales, derivadas de la química teórica. Se expusieron adultos de O bonaeriensis a 5 µg/l de cipermetrina durante 96 horas, con recambio diario de medio, manteniendo un grupo control. Se analizó la bilis sin tratamiento, un extracto etéreo y su correspondiente fase acuosa. Para ello se utilizó un HPLC  acoplado a un espectrómetro de masas de cuadrupolo simple, con fuentes de ionización electroespray (ESI) e ionización química a presión atmosférica (APCI), ambas en modos positivos y negativo, obteniéndose así 12 conjuntos de datos para cada tratamiento. La comparación visual de los distintos cromatogramas no mostro diferencias entre los perfiles gráficos por lo que los conjuntos de datos fueron ordenados y procesados utilizando métodos de alineamiento, normalizado, estandarización y comparación iónica. Los iones detectados en el cuadrupolo, derivados de la respuesta metabólica global en los distintos modos instrumentales, mostraron una mayor diversidad y cantidad para la fuente ESI, acorde al tipo de moléculas biológicas presentes en la bilis y sus extractos. Para la fase etérea se contabilizaron un promedio de 450 iones; para la componente acuosa complementaria 500 iones y en la bilis sin tratar 1100 iones. Del total de iones observados, una docena de ellos deprimieron su intensidad significativamente en los expuestos respecto a los controles y 18 vieron exaltada la señal considerando los mismos grupos de datos. El análisis de estos clusters permitió identificar a las moléculas de cipermetrina conjugadas con acido glucurónico y sulfatadas como productos de la exposición a cipermetrina. A diferencia de los métodos convencionales de comparación cromatografica, el método planteado fue muy sensible para discriminar en manera precisa el perfil de respuesta metabólica de los organismos expuestos respecto a los controles y aportó información sobre el metabolismo de detoxificación de este piretroide en la especie ensayada.