Hacia nuevos agentes de terapia fotodinámica: estudios de asociación entre un complejo de Re(I) y proteínas de transporte

HECTOR H. MARTINEZ SAAVEDRA; GUSTAVO T. RUIZ; FABRICIO RAGONE; GERARDO ARGUELLO; PABLO F. GARCÍA; EZEQUIEL WOLCAN

Tucuman

Congreso; III GRAFOB; 2016

GRAFOB

Towards New PDT Agents: Association Studies Between a Complex of Re(I) and Transport ProteinsFabricio Ragone1, Hector H. Martinez Saavedra2, Facundo Garcia3, Gerardo Argüello3, Gustavo T. Ruiz2, y Ezequiel Wolcan2 1 IIB?INTECH?CONICET, Universidad Nacional de San Martín, Intendente Marino km 8,2 C.C. 164, (B7130IWA), Chascomús, Buenos Aires, Argentina2 Instituto de Investigaciones Fisicoquímicas Teóricas y Aplicadas (INIFTA, UNLP, CCT La Plata-CONICET), Diag. 113 y 64, Sucursal 4, C.C. 16, 1900 La Plata, Argentinae-mail: gruiz@inifta.unlp.edu.ar fragone@inifta.unlp.edu.ar3 [INFIQC] - Inst. de investigaciones en físico-química, Universidad Nacional de Córdoba, Córdoba, ArgentinaA mediados de los años 70´ comenzaron estudiarse las diversas propiedades fotofísicas y fotoquímicas de los complejos tricarbonilicos de Re(I) coordinados a ligandos orgánicos [1]. Las notables características de sus estados excitados siguen hasta hoy, despertando un gran interés en distintos campos de investigación. Se ha demostrado que muchos de ellos son emisores eficientes y que pueden ser de gran utilidad en diferentes sistemas biológicos como sensores ópticos, fotosensibilizadores, fotocatalizadores, etc. Los complejos tricarbonilicos de Re(I) han sido propuestos como nuevos agentes terapéuticos en terapia fotodinámica (PDT), quimio y radioterapia [2] asi como antimicrobianos [3]. Con el objetivo de explotar estas propiedades en aplicaciones biomedicas es importante que el complejo sea eficientemente transportado por vía sanguínea. Las albuminas séricas son las proteínas más abundantes en el torrente circulatorio de los mamíferos. Estas proteínas contribuyen a al mantenimiento de la presión osmótica, control del pH sanguíneo [4], aunque su principal rol es el del transporte de numerosos ligandos en sangre [5]. En los estudios que presentamos evaluamos la asociación del complejo fac-ReI(CO)3(pterina)(H2O) donde pterina = 2-amino-4-oxo-pterinato tanto con albumina sérica humana (HSA) como bovina (BSA). Los estudios se realizaron utilizando técnicas de emisión estacionaria, emisión resuelta en el tiempo y dicroísmo circular. Se obtuvieron las constantes de asociación (Kb) mediante el estudio de la emisión de la albumina a distintas concentraciones del complejo, cuyo valor se encontró cercano a 6 x 105 M-1. Estas Kb obtenidas a distintas temperaturas nos permitieron estimar los parámetros termodinámicos propios de estos eventos de asociación. El análisis comparativo de las variaciones en la intensidad de emisión utilizando HSA y BSA junto a los parámetros termodinámicos nos permitió identificar al bolsillo hidrofóbico del subdominio IIA como el sitio primario de interacción. Finalmente, mediante estudios de dicroísmo circular verificamos la ausencia de modificaciones sustanciales en la estructura secundaria de la proteína luego de la unión. [1]A. Kumar, S. Sun, and A. J. Lees, ?Photophysics and Photochemistry of Organometallic Rhenium Diimine Complexes,? Top Organomet Chem, no. June 2009, pp. 1?35, 2010.[2]A. Leonidova and G. Gasser, ?Underestimated potential of organometallic rhenium complexes as anticancer agents,? ACS Chem. Biol., vol. 9, no. 10, pp. 2180?2193, 2014.[3]M. Navarro, W. Castro, and C. Biot, ?Bioorganometallic compounds with antimalarial targets: Inhibiting hemozoin formation,? Organometallics, vol. 31, no. 16, pp. 5715?5727, 2012.[4]T. Peters, ?Serum Albumin,? Adv. Protein Chem., vol. 37, pp. 161?245, 1985.[5]C. Bertucci and E. Domenici, ?Reversible and covalent binding of drugs to human serum albumin: methodological approaches and physiological relevance.,? Curr. Med. Chem., vol. 9, no. 15, pp. 1463?1481, 2002.