Evaluacion de los sistemas detoxificante y antioxidante del hongo entomopatgeno Beauveria bassiana luego de su exposicion a deltametrina

L. FORLANI; M. P. JUAREZ; S. LAVARIAS; N. PEDRINI

Buenos Aires

Congreso; II Congreso Microbiologia Agricola y Ambiental; 2013

Los hongos entomopatogenos constituyen un grupo de microorganismos que por su capacidad bioinsecticida representan una herramienta util para el control de insectos plaga tanto de interes agronomico como sanitario. Su combinacion con otros insecticidas quimicos o biologicos es una pr¨¢ctica aconsejada para el manejo integrado de plagas.  El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto del insecticida piretroide deltametrina (DM) en el metabolismo del hongo entomopatogeno Beauveria bassiana. Se estimo la concentracion inhibitoria media (CI50) de DM, se estudiaron los niveles de expresion de genes fungicos potencialmente involucrados tanto en la degradacion de DM como en la respuesta antioxidante ocasionada por este insecticida y se evaluaron tanto la actividad de enzimas antioxidantes como los niveles de estres oxidativo del hongo luego de su exposicion al insecticida. B. bassiana (cepa GHA) de cultivo durante 4 dias en medio completo solido adicionado con diferentes concentraciones de DM (0 a 500 ug/cm2). Se analizo mediante PCR cuantitativa a tiempo real la expresion de 6 genes codificantes para citocromo P450 monooxigenasas (cyp), 4 para catalasa (cat), 3 para superoxido dismutasa (sod) y genes de epoxido hidrolasa (eh), glutatiOn transferasa (gst) y glutation peroxidasa (gpx). Ademas, se evaluo espectrofotometricamente la actividad enzimatica de SOD, CAT, GST y GPx, asi como la peroxidacion lipidica (LPO). La CI50 estimada fue de 50 ug DM/cm2. Los genes cyp se expresaron diferencialmente, la induccion fue significativa para cyp52X1 y cyp617N1 (> 2 veces) y cyp655C1 (1,8 veces). Otros genes de P450 (cyp5337A1 y cyp539B5), asi como eh y gst mostraron una menor induccion. La expresion de los genes sod1, sod2 y sod3, catA, catB, catC, catD y gpx tambien aumento significativamente (2-3 veces). La actividad enzimatica de SOD tuvo un incremento significativo (8,6 ± 0,5 U/mg) a 250 Ug DM /cm2, mientras que a 500 Ug/cm2 la actividad se redujo a niveles similares que las del  control (6,5 ± 1,0 U/mg). CAT disminuyo significativamente su actividad a la m¨¢xima dosis ensayada comparado con el control (83,1 ± 10,9 U/mg). La actividad GST mostro una disminucion significativa (0.06 ± 0.01 U/mg) a dosis de DM > 50 Ug/cm2. Para todas las concentraciones de DM evaluadas, la actividad de GPx no mostro cambios significativos. A dosis > 250 ¦Ìg/cm2  los niveles de LPO (0,25 ± 0,01 Umol TBARS/mg) fueron significativamente mayores que en el control (0,18 ± 0,01). Estos resultados sugieren que la deltametrina no produce alteraciones importantes a nivel metabolico en B. bassiana, lo cual facilitaria la combinacion de ambos agentes insecticidas en programas de manejo integrado de plagas.