Caracterización de disadherina en el espermatozoide humano y tracto reproductor masculino.

GABRIELLI, N.M.; MATOS, M.L.; CHEMES, H.; QUINTANA, S.; VAZQUEZ-LEVIN, M.H.

Instituto de Biología y Medicina Experimental. Buenos Aires

Congreso; X Jornadas de la Sociedad Argentina de Biología.; 2008

Sociedad Argentina de Biología

Introducción: Disadherina (Dys) es una glicoproteína descripta en tejidos tumorales y algunas líneas celulares normales. Se le atribuye un rol regulador funcional de la cadherina epitelial (cadE). Nuestro grupo ha descripto la presencia de cadE en espermatozoides humanos y evidencias sugieren su participación en la adhesión de gametas. Objetivos: Evaluar la expresión de la Dys en el tracto reproductor masculino, su presencia en el espermatozoide y su colocalización con cadE. Métodos: se realizaron ensayos de RT-PCR y de Western inmunoblotting e inmunocitoquímica con anti Dys (NCCM53). Resultados: En ensayos de RT-PCR se detectó el ARNm de Dys en espermatozoides, testículo y epidídimo humanos. Evaluaciones por Western immunoblotting revelaron en testículo y espermatozoides la presencia de una forma proteica de 91 kDa y en epidídimo de 50 kDa, diferencias atribuibles a variaciones en la O-glicosilación. Dys fue inmunolocalizada en la región acrosomal de espermátides y en el capuchón acrosomal y flagelo espermático. Dys colocalizó con cadE en el capuchón acrosomal. Conclusiones: Dys está presente en testículo, epidídimo y espermatozoides humanos; su colocalización con cadE permite postular un rol modulador de la función de la proteína de adhesión. Version en inglés (Como será publicado en Biocell) Introduction: Dysadherin (Dys) is a membrane glycoprotein described in tumoral tissues and in some normal cells. A regulatory role upon epithelial cadherin (Ecad) function has been reported for Dys. Our group has previously reported the presence of Ecad in human spermatozoa and provided evidence on its participation in gamete adhesion. Objetives: To evaluate the expression of Dys in the male reproductive tract, as well as its presence in spermatozoa and colocalization with Ecad. Methods: RT-PCR for Dys mRNA detection, Western inmunoblotting and immunocytochemistry with anti Dys (NCCM53) for protein analysis. Results: RT-PCR studies revealed the presence of Dys mRNA in human testis, epididymis and spermatozoa. Western immunoblotting of testicular and sperm extracts showed a 91 kDa form, whereas in the epididymis a 50 kDa protein was detected; differences in Mr would be attributed to changes in O-glycosilation. Dys was immunolocalized in the acrosome of spermatids and in the acrosomal cap and flagelum of ejaculated spermatozoa. Dys colocalized with Ecad in the acrosomal region. Conclusion: Dys is present in the human testis, epididymis and spermatozoa; its colocalization with Ecad may anticipate a modulatory role upon Ecad adhesive function.