Interacción entre la señalización del ABA y el catabolismo de giberelinas: el factor de transcripción ABI5 se une al promotor de SbGA2ox3 en granos de sorgo granífero.

CANTORO, RENATA; RODRÍGUEZ M.V.; BENECH-ARNOLD R.L.

MAR DEL PLATA

Congreso; XXIX REUNION ARGENTINA DE FISIOLOGIA VEGETAL; 2012

SOCIEDAD ARGENTINA DE FISIOLOGIA VEGETAL (SAFV)

INTERACCIÓN ENTRE LA SEÑALIZACIÓN DEL ANA Y EL CATABOLISMO DE GIBERELINAS: EL FACTOR DE TRANSCRIPCIÓN ABI5 SE UNE AL PROMOTOR DE SbGA2ox3 EN GRANOS DE SORGO GRANÍFERO Cantoro R1, Rodriguez MV1, Benech Arnold R1,2.1IFEVA–CONICET. Fac. de Agronomia, UBA. rcantoro@agro.uba.ar; 2Cátedra de Cultivos Industriales, Facultad de Agronomia, UBA. Av. San Martin 4453. La variedad de sorgo granífero IS9530 presenta un elevado nivel de dormición a madurez fisiológica, y ello podría estar asociado a los bajos niveles de GAs detectados en sus granos. Estos granos muestran una elevada expresión del gen SbGA2oxC (enzima de inactivación de GAs) durante su incubación. El análisis de la secuencia del promotor de SbGA2oxC permitió identificar varios elementos cis-regulatorios involucrados en la regulación por ABA (ABREs, CE, RY). Asimismo, la expresión del gen y acumulación de proteína SbABI5 siguieron un patrón similar al de SbGA2oxC, indicando que podría ocurrir una interacción entre el promotor de este último gen y el factor de transcripción ABI5 (Rodriguez et al., 2009). El objetivo de este trabajo fue probar la interacción ¨in vitro¨ entre el factor de transcripción SbABI5 y el promotor del gen SbGA2oxC. Para ello, se expresó la proteína SbABI5-6His en E. coli, se purificó y se diseñó una sonda de 242 pb ubicada en el promotor de la SbGA2oxC. Se realizaron ensayos de EMSA mediante incubaciones de SbABI5-6His, sonda específica biotinilada, buffer, DNA de esperma de salmón y en ciertos casos, sondas competidoras (específica no biotinilada y no específica). Las reacciones fueron corridas en geles de acrilamida 6%, transferidas a membranas de nylon y reveladas en placas autoradiográficas. Los resultados mostraron que SbABI5 es capaz de interactuar físicamente con el promotor de la SbGA2oxC, provocando diferentes retardos de la sonda. Los ensayos de competencia indicaron que la unión entre estos elementos es específica, ya que SbABI5 no se unió a una sonda inespecífica de similar tamaño y la interacción SbABI5-SbGA2oxC pudo ser competida con sonda específica no biotinilada. Estos resultados indican que la interacción entre estos elementos vinculados al metabolismo de las GAs y la señalización del ABA podría ocurrir ¨in vivo¨, y ello podría ser un mecanismo importante para explicar la elevada dormición de semillas de IS9530.