Polimorsmo de genes asociados en la generacion de resistencia a farmacos nitroheteroc clicos en Trypanosoma cruzi

CURTO MARÍA DE LOS ÁNGELES; MUÑOZ CALDERÓN ARTURO; SCHIJMAN, ALEJANDRO G.; APODACA SOFÍA

Congreso; . XXX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2018

(ECh) ha sido relacionado con el polimorsmo genetico de las poblaciones de Trypanosoma cruzi. La heterogeneidadgenetica encontrada en T. cruzi se considera uno de los principales factores implicados en larespuesta farmacologica de la ECh, sin embargo, hasta la fecha, el rol que tienen los polimorsmos en genesde resistencia sobre escenarios clnicos de la infeccion por T. cruzi y los estudios de genetica poblacionalque permitan asociar marcadores moleculares del parasito con falla terapeutica son escasos.Objetivos: Este trabajo tuvo como nalidad caracterizar el polimorsmo genetico del locus que codicala enzima nitroreductasa de tipo I en T. cruzi (TcNTR1) y de un locus para una enzima oxidoreductasaputativa (TcOXR) no descrito hasta ahora en T. cruzi. Se utilizo ADNg obtenido de cepas de T. cruzi ymuestras clnicas de pacientes refractarios al tratamiento etiologico con los farmacos disponibles, Benznidazoly Nifurtimox.Metodos: A partir de secuencias geneticas de referencia, se realizaron alineamientos mediante CLUSTALpara el dise~no de oligonucleotidos que amplican fragmentos de 943pb y 880pb correspondientes a loci TcNTR1 y TcOXR, respectivamente. Las asociaciones geneticas se evaluaron mediante secuenciacion tipoSanger. Los alineamientos entre las secuencias obtenidas fueron realizados con Megalign (DNASTAR) y losanalisis bioinformaticos mediante diversas herramientas estadsticas.Resultados: Ambos genes mostraron una identidad de secuencia que promedio el 96% entre las cepasde referencia y un ndice de diversidad media poblacional de 0,027. Se identicaron numerosas mutacionespuntuales, siendo mas frecuentes las transiciones de nucleotidos C-T. Por primera vez, se logro caracterizarambos genes directamente en muestras de sangre periferica de cinco (5) pacientes con ECh refractarios atratamiento.Conclusiones: El presente estudio, al mostrar por primera vez la diversidad nucleotdica de genes implicadosen fenomenos de resistencia a farmacos nitroheterocclicos, genera un abordaje metodologico conpotencial para el dise~no de marcadores de deteccion temprana de cepas resistentes, lo que contribuira aun mejor manejo terapeutico del paciente, disminucion en el riesgo de seleccion de cepas multi-resistentes afarmacos y suministrara informacion epidemiologica valiosa para la ejecucion de los programas de controlde la ECh.