Autoensamblado de aptámeros via fosforotioato para el desarrollo de biosensores electroquímicos

M. BELÉN PONCE, HELENA M. CERETTI, SILVANA A. RAMÍREZ, JAVIER M. MONTSERRAT

Salta

Congreso; XXVI Congreso Argentino de Fisicoquímica y Química Inorgánica; 2009

Los oligonucleótidos funcionales son un nuevo grupo dentro de los ácidos nucleicos, que se caracterizan por tener funciones de catálisis y reconocimiento molecular. En particular, los aptámeros son secuencias de ARN o ADN capaces de formar complejos muy selectivos con diversas moléculas blanco: péptidos, proteínas, o moléculas orgánicas pequeñas. Esta capacidad ha sido aprovechada para el desarrollo de sensores electroquímicos donde se utiliza un aptámero como capa de biorreconocimiento. En general el armado de dicha capa, involucra el anclaje del aptámero modificado con un grupo tiol a la superficie del oro (enlace S-Au). Una alternativa atractiva, por su menor costo y mayor versatilidad sintética, consiste en el empleo de un grupo fosforotioato (Ts). Ad: adenosina Fc: ferroceno Ad El objetivo de este trabajo es la construcción de un sensor bioelectroquímico de base aptamérica para adenosina. En una primera etapa se estudió la inmovilización de la secuencia de ADN modificada con Ts (oligoTs) empleando técnicas electroquímicas (voltametría cíclica, VC, y cronoculombimetría), de caracterización de superficies (XPS) y radioquímicas (g-32P). A continuación se introdujo un marcador electroactivo (carboxiferroceno) en la secuencia aptamérica con el fin de evaluar la respuesta del sensor frente a la molécula blanco (ver Figura).