PRODUCCIÓN DE ANTÍGENOS VIRALES EN PLANTAS TRANSPLASTÓMICAS DE TABACO PARA EL DESARROLLO DE VACUNAS DE USO VETERINARIO

EZEQUIEL M. LENTZ, MARÍA E. SEGRETIN, MAURO M. MORGENFELFD, CRISTINA GOMEZ, MARÍA J. DUS SANTOS, ANDRÉS WIGDOROVITZ, FERNANDO F. BRAVO-ALMONACID

Rosario, Santa Fe, Argentina

Congreso; XIII Reunión Latinoamericana y XXVII Reunión Argentina de Fisiología Vegetal; 2008

Sociedad Argentina de Fisiología Vegetal (SAFV)

El objetivo del trabajo fue evaluar la factibilidad de utilizar plantas transplastómicas de tabaco para la producción de antígenos virales de interés veterinario.  Para ello, se transformó por biobalística el genoma plastídico de plantas de tabaco (Nicotiana tabacum cv Petit Havana), utilizando el vector desarrollado previamente en el laboratorio: pBSW5’UTR), que permite la integración del transgén en el operón rrn, entre las secuencias que codifican para el ARNr 16S y el ARNt de Isoleucina.  El antígeno elegido fue un epítope de la proteína de cápside VP1 del virus de la fiebre aftosa (FMDV), expresado como proteína de fusión a la enzima b-glucuronidasa (GUS).  La transformación del genoma plastídico fue confirmada por southern blot, y el nivel de expresión del transgén fue evaluado por ensayos de actividad GUS y western blot.  Ensayos de SDS-PAGE y tinción con Coomassie brilliant blue permiten estimar que la expresión de la proteína recombinante P1::GUS  correspondería aproximadamente al 20% de las proteínas solubles totales.  Actualmente se está evaluando la inmunogenicidad del antígeno de fusión en un modelo murino.  La fusión con la enzima b-glucuronidasa permitiría estabilizar el antígeno en el cloroplasto y se prevé en futuras construcciones incluir un sitio para procesamiento por una proteasa específica, a fin de obtener el antígeno aislado.