Avances en la caracterización de un homólogo del gen wee1 en Trypanosoma brucei

BOYNAK NY, ROJAS F., D´ ALESSIO C, TÉLLEZ- IÑÓN MT.

Rosario, Argentina

Congreso; VIII Congreso Argentino de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2008

El control del ciclo celular en tripanosomátidos está regulado por quinasas relacionadas a cdc2 (CRKs) que se unen a ciclinas, algunas ya identificadas. El producto del gen wee1 es una proteína quinasa que actúa como un regulador negativo de la entrada en mitosis, específicamente durante la transición G2/ M. La activación de Wee protege al núcleo del complejo activo Cdc2 quinasa/ciclina B pues lo fosforila e inactiva. Esta fosforilación ocurre exclusivamente en la Tyr-15. La primer quinasa aislada del tipo Wee pertenece a Schizosaccharomyces pombe y homólogos de la misma han sido identificados y caracterizados en un amplio rango de especies. En tripanosomatidos no se conocen los genes que regulan los complejos homólogos a Cdc2 quinasa/ciclina B durante el pasaje G2/ M del ciclo celular. Por análisis bioinformático recientemente se ha identificado la presencia de wee en el genoma de T.brucei y T cruzi. La proteina Wee se detectó en extractos de las distintos estadíos de T. cruzi y en procíclicos de T brucei con el antisuero policlonal específico preparado con la proteína recombinante His-wee en ratón. Para estudiar la función potencial de esta proteína se usó la técnica de RNA de interferencia en parásitos T. brucei prociclicos. La putativa proteína fue clonada en el vector pZJM inducible por tetraciclina. Resultados previos indican que el crecimiento de los parásitos sólo se ve afectado en tiempos largos (9 días) sin modificación fenotípica. Actualmente se están realizando ensayos de complementación en S. pombe clonando y transformando levaduras mutantes de wee_. con el gen de T brucei y de T. cruzi. El estudio nos permitirá avanzar sobre la participación de sta proteína en los tripanosomátidos.