Identificación de las proteínas que se asocian a TcCALI, una proteína hipotética de unión a calcio expresada en Trypanosoma cruzi

POTENZA MARIANA; TELLEZ-IÑÓN MARIA TERESA; WEHRENDT DIANA

Congreso; XXVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2016

Sociedad Argentina de Protozoología

Las variaciones intracelulares del ión calcio (Ca++) juegan un papel fundamentalen procesos claves del ciclo de vida de Trypanosomacruzi. Durante la invasión a células de mamífero, la concentraciónintracelular de Ca++ de T.cruzi aumenta transitoriamente como consecuencia de la adhesión a lamembrana externa de la célula hospedadora. En la diferenciación de las formasno infectivas (epimastigotes), hacia las infectivas (tripomastigotes) tambiénse observan cambios en los niveles de Ca++, que involucran laactivación de señales mediadas por este ión. Sin embargo, el conocimiento de ladecodificación y la traducción de las señales mediadas por Ca++ en T. cruzi es escaso. El genoma de esteparásito codifica para varios canales y proteínas de unión a Ca++, aunquela mayoría permanecen sin caracterizar. Existe también evidencia experimentalde expresión de proteínas con dominio de unión a Ca++ denominadashipotéticas o nuevas. Estas proteínas presentan dominios específicos desecuencia que no muestran similitud significativa con aquellas expresadas en lascélulas de mamífero que parasitan y por lo tanto, no tienen función putativaasignada. En un trabajo previo identificamos a una proteína hipotética condominio de unión a Ca++ TcCALI,que se expresa en todas las formas del parásito T. cruzi. Con el objetivo de conocer las proteínas queinteraccionan con TcCALI in vivo se realizó un ensayo de doblehíbrido. Como resultado, se identificaron dos proteínas, ambas anotadas comohipotéticas. Una de ellas corresponde a una proteína con homología aprefoldinas (TcCLB.506925.190) y otra que contieneun dominio tipo ARM, por "armadillo" (TcCLB.511421.200). Este últimoconsta de una secuencia repetitiva de 40 aminoácidos de longitud que se asocianpara formar estructuras alfa hélice superpuestas. En algunas proteínas, estosdominios son importantes en la liberación de calcio del retículo endoplasmáticoen pos de regular los niveles intracelulares de este ión. Luego de corroborarla especificidad de estas interacciones (controles de interacción específica),se estudiará la co-localización de TcCALIy sus moléculas de unión durante los procesos de diferenciación e infección de T. cruzi en células de mamífero. Elestudio de estas nuevas proteínas permitirá avanzar en el conocimiento de lasseñales mediadas por Ca++propias de este patógeno. FinanciaciónPICT 2012-2109 y  Conicet