Poli(ADP-ribosa) como señal de muerte celular en trypanosomas

MARIANA SCHLESINGER; SALOME VILCHEZ LARREA; MARIA LAURA KEVORKIAN; MIRTHA M. FLAWIA; SILVIA FERNANDEZ VILLAMIL

Autónoma de Buenos Aires

Congreso; XVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2015

Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias

Poli(ADP-ribosa)polimerasa es la enzima que cataliza la formación de homopolímeros de ADP-ribosa (PAR), fundamentalmente en respuesta a daños al ADN. El metabolismo de PAR es un proceso dinámico y PARG (PAR glicohidrolasa) es la enzima principal en la degradación de dicho polímero. Los tripanosomátidos poseen una única PARP y PARG, cuya localización subcelular es opuesta a la reportada en otras especies. En T. cruzi hemos propuesto que la activación de PARP juega un rol dual, asistiendo a los mecanismos de reparación cuando el daño es subletal, mientras que en condiciones de daño letal, PAR podría actuar como un mecanismo de switch entre apoptosis y necrosis, dependiendo del tipo de daño genotóxico. Experimentos llevados a cabo con parásitos procíclicos de Trypanosoma brucei silenciados (RNAi-TbPARP) indicaron que la falta de TbPARP no altera la tasa de crecimiento en condiciones normales, confirmando lo propuesto por estudios de RIT-seq. Estos parásitos, sin embargo, exhibieron una sensibilidad disminuida a dosis letales de H2O2. Estos resultados sugieren que PAR podría actuar como señal de muerte celular. Para evaluar la importancia de la acumulación de PAR en el núcleo de parásitos expuestos a agentes oxidantes, obtuvimos parásitos procíclicos RNAiTbPARG y sobreexpresantes de TbPARP. Ambos parásitos transgénicos no mostraron alteraciones morfológicas, pero si una disminución de la tasa de crecimiento y una mayor sensibilidad al agente oxidante. Análisis por citometría de flujo con Anexina V e IP mostraron que, cuando dichos parásitos son sometidos a una dosis letal de H2O2, se induce un patrón de muerte celular diferente a los parásitos silvestres. La clasificación de los distintos tipos de muerte celular es cada vez más compleja y recientemente se ha reconocido otra forma de muerte celular denominada Parthanatos. Este mecanismo comparte algunas características bioquímicas y morfológicas con otros tipos de muerte celular y se caracteriza por suceder a una rápida activación de PARP con acumulación de PAR en el núcleo. Los resultados sugieren que este tipo de muerte celular podría proceder en tripanosomas.