PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD EXTERNO PARA EL MONITOREO POR PCR EN TIEMPO REAL EN

RAMIREZ JUAN CARLOS; PARRADO RUDY; SULLEIRO ELENA; DE LA BARRA ANABEL; RODRIGUEZ MARCELO; IRAZU LUCIA; CURTO, MARÍA DE LOS ANGELES; GARCIA LINETH; MOLINA ISRAEL; RIBEIRO ISABELA; SCHIJMAN ALEJANDRO GABRIEL

XXVII Reunión Anual

Congreso; XXVII Reunión Anual; 2015

Sociedad Argentina de Protozoología

El monitoreo por PCR en Tiempo Real (qPCR) es un marcador de falla terapéutica altamente recomendado en los ensayosclínicos de la enfermedad de Chagas, pero hasta la fecha ningún programa de control de calidad externo (CCE) ha evaluadoel desempeño de los ensayos de qPCR utilizados en los diferentes ensayos clínicos. Se diseñó un programa de CCE paraevaluar el rendimiento de las qPCRs utilizadas en los ensayos clínicos E1224 y Chagasazol realizados en Bolivia y España,respectivamente. Cuatro paneles con muestras de sangre negativa en buffer Guanidina HCl 6M EDTA 0.2M pH 8,contaminadas con 0, 1, 10 y 100 equivalentes parasitarios (eq. par.)/mL de las cepas K98 (TcIa), Sylvio X10 (TcId), LL014-1-R1 (TcV) y CL-Brener (TcVI), fueron preparados por el LaBMECh (Lab Ref) del INGEBI, Buenos Aires, Argentina. Los paneles se analizaron a ciegas a los 0, 3, 6 y 9 meses en los laboratorios de Bolivia (LabB), España (LabC) y el Lab Ref. La acordancia(acuerdo intra-laboratorio) y concordancia (acuerdo inter-laboratorio) global de los resultados a nivel cualitativo fueron de49.7, 84.2 y 100%, y 50.1, 82.7 y 100%, para 1, 10 y 100 eq. par./mL, respectivamente, y del 100% para los controlesnegativos. La comparación de los Cts reveló la existencia de diferencias significativas entre las cepas utilizadas, con menoresCts para las cepas K98 (TcIa) y CL-Brener (TcVI). No se encontraron diferencias significativas entre los laboratorios para cadapanel, excepto para el panel 2 entre el Lab Ref y el LabC. Además, no hubo diferencias significativas entre los paneles paracada laboratorio, lo cual evidencia una adecuada conservación de las muestras durante el estudio. El programa de CCE parael monitoreo por qPCR en ensayos clínicos de la enfermedad de Chagas resultó ser una estrategia factible y de elevadautilidad, por lo que se recomienda su aplicación en los laboratorios de diagnóstico molecular del Sistema de Salud.