Expresión de la multimérica y altamente inmunogénica Lumazina Sintasa de Brucella spp. fusionada a la proteína VP8d de rotavirus bovino como una plataforma para la producción de antígenos en cloroplastos de tabaco

E. FEDERICO ALFANO; EZEQUIEL M. LENTZ; DEMIAN BELLIDO; MARIA JOSÉ DUS SANTOS; FERNANDO GOLDBAUM; ANDRÉS WIGDOROVITZ; FERNANDO F. BRAVO-ALMONACID

Bernal

Jornada; 2º JORNADAS DE DOCTORANDOS Y ESTUDIANTES AVNZADOS DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA; 2015

Universidad Nacional de Quilmes

Lumazina Sintasa de Brucella spp. (BLS) es una proteína decamérica altamente inmunogénica que puede acomodar otros polipéptidos o dominios proteicos fusionados a su extremo N-terminal, incrementando marcadamente su inmunogenicidad.El dominio interno (VP8d) de la proteína espicular VP8 de rotavirus bovino (RVB) presenta epítopes neutralizantes y es responsable de la adhesión viral a residuos de ácido salicílico y la infección.En este trabajo la plataforma BLS fue evaluada por primera vez en plantas para desarrollar vacunas recombinantes mediante la fusión N-terminal de BLS a VP8d y la expresión de la fusión resultante (BLSVP8d) en cloroplastos de tabaco. Se obtuvieron plantas transplastómicas por biobalística que fueron caracterizadas molecularmente. BLSVP8d se expresó en altos niveles: 40% de la proteína soluble total (PST) (4,85 mg/g tejido fresco). BLSVP8d se mantuvo soluble y estable durante el desarrollo de la planta e incluso en hojas liofilizadas. Extractos proteicos solubles de hojas frescas y liofilizadas indujeron anticuerpos IgY específicos en gallinas ponedoras. BLS resultó ser una plataforma interesante para la producción de vacunas a subunidad altamente inmunogénicas. La liofilización de hojas transplastómicas expresando fusiones antigénicas estables a BLS reduciría los costos y simplificaría el procesamiento, purificación y almacenamiento, dando lugar a protocolos de inmunización más racionales.