Diseño de un sistema para la expresión inducible de proteínas en plastidos de Nicotiana tabacum inspirado en el mecanismo de quórum sensing

BOCCARDO NA; SEGRETIN ME; BRAVO ALMONACID FF

Mar del Plata

Congreso; XV Congreso Latinoamericano y XXX Reunion Argentina de Fisiologia Vegetal.; 2014

Muchos cultivos son afectados por enfermedades que alteran su productividad comprometiendo la seguridad alimentaria. Se han destinado esfuerzos para la obtención de cultivos resistentes a patógenos mediante transgénesis. La transformación del genoma plastídico presenta ventajas frente a la transformación del genoma nuclear, entre ellas: mayor número de copias del transgen, ausencia de efectos de posición y silenciamiento, mayores niveles de expresión, y herencia materna de los cloroplastos en muchas especies de interés.El objetivo de este trabajo es desarrollar un sistema de expresión inducible inspirado en el mecanismo bacteriano de quorum sensing (QS). A partir de un vector de trasformación plastídica generado previamente en el laboratorio, se ensamblaron los siguientes elementos del sistema de QS de Pseudomonas aeruginosa: el promotor del gen lasB fue clonado río arriba del gen reportero uidA, y las secuencias codificantes de las proteínas regulatorias LasR y RhlR fueron incluidas solas o combinadas en un policistrón rio abajo de la secuencia promotora psbA. Se obtuvieron líneas transplastómicas para cada construcción que están siendo evaluadas por expresión de la proteína GUS post-tratamiento con las homoserin lactonas (HSLs) C4-HSL y 3-oxo-C12-HSL, que junto con sus proteínas reguladoras afines (LasR y RhlR, respectivamente) permiten la transcripción desde el promotor LasB.