Actividad hidrolítica de la fosfotriesterasa de B. diminuta para su uso en la degradación de pesticidas organofosforados

JULIETA BERTANA LAHOURCADE; ELIZABETH LEWKOWICZ; ADOLFO IRIBARREN

Mar del Plata

Simposio; XIX Simposio Nacional de Química Organica; 2013

SAIQO

Los pesticidas artificiales organofosforados (OPs) son los productos químicos más comunmente utilizados en la agricultura a nivel mundial para controlar las plagas de insectos. Se caracterizan por ser altamente tóxicos en el hombre y animales. La enzima que degrada dichos compuestos fue denominada fosfotriesterasa (PTE) y se identificó por primera vez en Brevundimonas diminuta y Flavobacterium sp.1 Los altos costos de purificación de la enzima y la disminución de su estabilidad una vez purificada limitan su aplicación práctica a gran escala. Como una alternativa económica, se pueden utilizar células enteras. Sin embargo, este método presenta como desventaja que el compuesto OP debe difundir a través de la membrana externa para llegar hasta la enzima. Para superar esta limitación y aumentar la tasa de detoxificación, se propone utilizar un motivo de anclaje a la membrana plasmática externa de las células y así, direccionar la enzima a la superficie celular. En el presente trabajo, se describe el diseño y desarrollo de un sistema de anclaje para direccionar la PTE de B. diminuta a la membrana externa de Escherichia coli. Dicha construcción, se sobreexpresó en células E. coli BL21. Se confirmó la identidad de la proteína recombinante por análisis de la huella peptídica mediante espectrometría de masas MALDI TOF.