Desarrollo de Marcadores Moleculares de linaje para estudiar tropismo de vector y hospedero en la infeccion por Trypanosoma cruzi.: PCR Inter -Elementos Repetitivos

: DUFFY, T.; BURGOS, JM.; BISIO, M.; CARDINAL, V., MEJÍA JARAMILLO, AM, LEVIN, MJ; GURTLER, RE.; TRIANA CHAVEZ, O Y SCHIJMAN AG.

La Plata, Argentina

Congreso; I Congreso Panamericano de Zoonosis; 2006

Introduccion: El estudio del polimorfismo genético de T. cruzi es relevante para investigar su rol en el tropismo de hospederos y vectores como en el espectro de manifestaciones de la enfermedad de Chagas. T.cruzi se clasifica en 6 linajes: TC1, TCIIa-e. Aun no existen marcadores moleculares para identificar linajes capaces de discriminar algunas infecciones mixtas. Objetivo: Analizar la distribución genómica diferencial de los elementos repetitivos (RE) SIRE, L1Tc y TcIRE, para explorar estrategias de PCR inter-RE discriminatorias de linaje. Materiales y método: PCR inter-RE consiste en amplificar fragmentos genómicos entre elementos RE contiguos. Se realizaron experiencias de INTER–RE con distintas combinaciones de primers: incluyendo siempre un primer para SIRE y otro/s primer/s para SIRE, L1Tc o TcIRE con cepas de referencia y aislamientos de distintos vectores y hospederos. Resultados: Se observó una distribución diferencial de SIRE en los distintos linajes, mientras que L1Tc y TcIRE están homogéneamente distribuidos. Los amplicones diferenciales fueron clonados y secuenciados (TABLA). Marcador       Primers                     PM           Secuencia                         Discriminación  IS-1                  INSF/INSR                    600            transialidasa                       IIe / IIb-IId IS-2                  SIREC/INSR                 380            SIRE en tandem                  IIb / IId-IIe          IS-3                  INSR-INSF                    200           pseudogen transialidasa       IIb / IId-IIe          IS-4                  INSR-INSF                    520            region subtelomerica            IId / I-IIb-IIe        IS-5                  INSR-LITcF                   900            en procesamiento                IIe / IId, IS-6                  INSR-LITcR                   230            en procesamiento                IIb/ IIe,              IS-7                  INSF/INSR                     700           en procesamiento               I / IIb-IId-IIe Conclusiones: Estos nuevos marcadores moleculares están en proceso de validación para su incorporación a un algoritmo de identificación de linajes en muestras biológicas infectadas con linajes múltiples.