INGEBI 02650
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES EN INGENIERIA GENETICA Y BIOLOGIA MOLECULAR "DR. HECTOR N TORRES"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Inhibición selectiva de la traducción en tripanosomátidos por un anticuerpo recombinante anti-TcP2beta
Autor/es:
LEANDRO SIMONETTI; CRISTIAN R. SMULSKI; MAXIMILIANO JURI AYUB; BENSON C. NYAMBEGA; KARINA A. GOMEZ; SILVIA A. LONGHI; TOMAS DUFFY; JOHAN HOEBEKE; MARIANO J. LEVIN
Lugar:
Ascochinga, Córdoba.
Reunión:
Congreso; XXIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias (SAP); 2010
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias (SAP)
Resumen:
Las proteínas ribosomales P tienen un rol crítico en la síntesis de proteínas durante el proceso de elongación. En nuestro laboratorio se construyó un anticuerpo recombinante de cadena simple (scFv) contra la proteína ribosomal P TcP2beta, denominado C5, que reconoce la región C-terminal de todas las proteínas P de Trypanosoma cruzi. Aunque esta región está altamente conservada entre las distintas especies, estudios filogenéticos muestran que las proteínas ribosomales P de los trypanosomátidos divergen tempranamente de la de mamíferos. Más aún, el análisis por surface plasmon resonance mostró que C5 posee baja afinidad por el correspondiente epítope de mamífero. Experimentos de síntesis de proteínas in vitro muestran que el scFv C5 inhibe específicamente la traducción en ribosomas de T. cruzi y de Crithidia fasciculata, mientras que no tiene efecto sobre ribosomas de Rattus norvegicus. Por lo tanto, se utilizó la secuencia codificante de scFv C5 para construir intrabodies en Trypanosoma brucei. En los parásitos transgénicos se observó una localización citoplasmática del anticuerpo por ensayos de inmunofluorescencia, mientras que se detectó el ARNm del scFv C5 por RT-PCR y la proteína por western blot. Los parásitos transfectados con el scFv C5 mostraron un tamaño anormal, acompañado de un fuerte descenso en su tasa de crecimiento. Estos resultados sugieren que las proteínas ribosomales P de T. cruzi podrían ser un posible blanco de agentes terapéuticos selectivos que pudieran derivarse del análisis estructural del anticuerpo scFv C5 y refuerza la importancia de las región C-terminal de las proteínas P en la actividad de traducción del ribosoma.
