Informe de Solicitud de Análisis de Línea Celular SF9

CHIRINO M, ROSSI LF, MERANI MS

2013-02-07/2013-03-07

Biológica

Proteccion agropecuaria-Varios

Los recuentos hallados para las células SF9 (Banco de trabajo 7/2/2012) del Protocolo 1098 del Laboratorio de Biología Cromosómica con fecha 10 de junio de 2013 se detallan a continuación. Materiales y Métodos La homogeneidad de la línea es esencial en la industria y en la investigación para obtener datos reproductibles y específicamente en células que presentan cromosomas holocinéticos, los cuales son citológicamente inestables. Con el fin de realizar la evaluación de esta, las células de crecimiento en suspensión recibieron un tratamiento antimitótico con Velvet (vinblastina [5 mg/mL] durante 3 hs). Posteriormente se suspendieron en solución hipotónica (KCl 0.07M durante 20 minutos a 28°C) y se procedió a su fijación (3:1; metanol:ácido acético). Luego para la observación de las células se realizaron preparados con la técnica de secado al aire. Las muestras se cuantificaron analizando mediante observación directa, la dimensión de los núcleos en interface (Jarman-Smith et al., 2002), con el fin de detectar con certeza las diferentes poblaciones celulares. Los recuentos fueron realizados en células integras de citoplasma sin roturas a un aumento de 40X con un microscopio Leica DM 2500; se contaron un total de 500 células en cuatro portaobjetos distintos. Las células de un diámetro de hasta 15 µm fueron consideradas diploides, mientras que las células de diámetro considerablemente mayor a 15 µm fueron consideradas poliploides (~ 20 µm). Resultados y Conclusiones El número de células poliploides observadas fue de 4,7 en 2000 células contadas. Se detectaron así 2 poblaciones celulares. La muestra analizada presenta un porcentaje de poliploidía que no difiere y es concordante con el de la línea y la especie que le dio origen (Spodoptera frugiperda) publicado por Jarman-Smith et al. 2002.