Informe de Solicitud de Análisis de Línea Celular SF9 remitido por el INTA: Muestra: Mater Seed SF9 10/7/2012.

ROSSI LF, ALONSO FM, CHIRINO M, MERANI MS

2013-06-10/2013-06-30

Biológica

Agropecuario

Las células de crecimiento en suspensión recibieron un tratamiento antimitótico con Velvet (vinblastina [5 mg/mL] durante 3 hs). Posteriormente se suspendieron en solución hipotónica (KCl 0.07 M. durante 20 minutos a 28°C) y se procedió a su fijación (3:1; metanol:ácido acético). Luego para la observación de las metafases se realizaron preparados con la técnica de ?secado al aire?. Los recuentos fueron realizados en metafases específicamente seleccionadas de células integras que presentaron el citoplasma sin roturas a un aumento de 10X. Una vez seleccionadas de forma obligatoria, se registraron las coordenadas de las mismas y se pasaron a un aumento de 100X, se contaron y fotografiaron. Por cada número diploide distinto que hubiese aparecido durante el recuento se aumentó el recuento de 5 metafases hasta un máximo de 50 metafases por portaobjeto. Esta metodología permite detectar con un grado de certeza del 90% la presencia en el cultivo de diferentes poblaciones y subpoblaciones si las hubiera. Resultados y Conclusiones En la muestra analizada se detectaron dos tipos de poblaciones celulares, diploides (37.3%; 2n=116-194) y poliploides (62.7%; 2n= 212-350). La muestra analizada presenta un porcentaje de poliploidía que no difiere y es concordante con el de la línea y la especie que le dio origen (Spodoptera frugiperda) publicado por Jarman-Smith et al. 2002.