INVESTIGADORES
LAGARES Antonio
convenios, asesorías y/o servicios tecnológicos
Título:
CARACTERIZACIÓN MICROBIANA POR DNA FINGERPRINTING (ST3074)
Autor/es:
LAGARES, A.
Fecha inicio:
2018-02-01
Fecha finalización:
2018-02-01
Campo de Aplicación:
Otros campos
Descripción:
La extracción de DNA se realiza mediante lisis celular por alta temperatura y adición de suspensión acuosa de resina al 6% Chelex-100 (BIO-RAD). La amplificación de regiones específicas del genoma se lleva a cabo empleando todos los reactivos necesarios para PCR y oligonucleótidos BOX A1R, ERC 1R/2 o REP 1R/2 según corresponda. Las condiciones de reacción incluyen un ciclo de activación inicial (95°C por 15 min), 35 ciclos de 94°C por 1 min, 53°C por 1 min y 72°C por 2,5 min y finalmente un ciclo de elongación final (72°C por 10 min). Los productos de PCR serán detectados mediante electroforesis en geles de agarosa al 0,8-1,5% utilizando buffer TBE 0,5X con la adición de 1 μg/ml de bromuro de etidio (visualización por transiluminador UV).
