PERSONAL DE APOYO
FERNÁNDEZ Jorge GermÁn
convenios, asesorías y/o servicios tecnológicos
Título:
Estudios de biosimilaridad de proteína recombinante de 19 kDa
Autor/es:
MARIA PIA VALACCO; SILVIA MORENO DE COLONNA; RICARDO MARTIN NEME TAUIL; JORGE GERMÁN FERNÁNDEZ
Fecha inicio:
2017-01-01
Fecha finalización:
2017-12-01
Campo de Aplicación:
Salud humana
Descripción:
Se desea determinar y verificar secuencia primaria de una proteína recombinante de un PM aproximado de 19 kDa con estructura simple. En una segunda etapa se realizarán estudios para evaluar el grado de glicosilación de la proteína.Se está repitiendo la determinación por HPLC, acoplado a MSMS con tecnología Orbitrap (Q Exactive), de la masa molecular intacta.Se realizaron digestiones enzimáticas de la molécula con varias proteasas de sitio de corte específico.(Tripsina, Quimotripsina, Gluc-c, Asp-N) y se analizaron los fragmentos proteolíticos por MS y MSMS con nanoHPLC, acoplada a Q Exactive para lograr cobertura total de la secuencia con los péptidos identificados.Se logró una cobertura del 100%.Se ha podido avanzar con un 70% del proyecto.Se deben repetir los ensayos de digestión con múltiples enzimas en simultáneo para poder lograr el 100% de la cobertura por MSMS en un único ensayo.
