Rol de la aquaporina 2 en la regulación de volumen celular.

FORD, PAULA; RIVAROLA, VALERIA; CHARA, OSVALDO; PARISI, MARIO; CAPURRO, CLAUDIA

Mar del Plata - Argentina

Congreso; I Congreso Conjunto de las Sociedades Biomédicas; 2004

SAIC-SAI-SAFE-SABiol-SABiof-SAN-SAF

Las células de los túbulos colectores (TC) del riñón de mamífero están expuestas a un amplio rango de la osmolaridad extracelular y requieren de importantes mecanismos de regulación de volumen para mantener la homeostasis intracelular. La permeabilidad al agua de estas células es regulada por la hormona antidiurética. Esta hormona induce la incorporación de canales específicos para el transporte de agua (acuaporina 2: AQP2) en la membrana apical de las células principales del TC. El objetivo de este trabajo fue investigar, en presencia de gradientes osmóticos, la activación de mecanismos de regulación de volumen, en células de TC y el posible rol de la AQP2 en estos procesos. Para ello utilizamos dos líneas celulares derivadas del TC cortical de rata: una de ellas no expresa acuaporinas (WT-RCCD1) y la otra transfectada en forma estable con la AQP2 (AQP2-RCCD1). Los resultados de inmunolacalización muestran que la AQP2 se expresa constitutivamente en la membrana apical. Utilizamos una técnica de microscopía de fluorescencia la cual permite la medición simultánea del volumen y el pH en células crecidas formando monocapas. Experimentos con medio hipertónico demostraron que independientemente de la expresión de la AQP2 las células RCCD1 no desarrollan un mecanismo de regulación del volumen. Por el contrario al someter las células a un gradiente hipotónico se desencadenan mecanismos de regulación del volumen en ambas líneas celulares. Sin embargo, el tiempo que tardan en alcanzar el máximo volumen y la latencia antes de comenzar la regulación es significativamente menor en las células que expresan AQP2 (p<0.001). Esta respuesta reguladora ocurre en paralelo con una acidificación intracelular la cual es mas rápida en AQP2-RCCD1 (p<0.05). Estos resultados sugieren que la expresión de AQP2 es fundamental para una rápida activación de los mecanismos de regulación de volumen.