Expresión de TRH y sustancias relacionadas en una línea celular derivada de un astrocitomaglioblastoma humano

GARCIA, SILVIA I; MARTINEZ, VERÓNICA; FINKIELMAN, SAMUEL; RIVAROLA, VALERIA; KOVALOVSKY, DAMIAN; NAHMOD, VICTOR E; PIROLA, CARLOS J

Mar del Plata - Argentina

Congreso; XXXIX reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 1994

Sociedad Argentina de Investigaciones Clinicas

El sistema colinérgico muscarínico regula el sistema de la TRH en el área preóptica de la rata. Para estudiar dicha interacción a nivel molecular en un modelo más simple, se caracterizó la producción de TRH en una línea celular continua derivada de un astrocitomaglioblas-toma humano (U-373 MG) deprivada de suero fetal bovino por 24 hs. Para ello, se cuantificó el contenido de TRH en las células y en el medio de cultivo mediante RÍA. La inmunorreactividad similar a la TRH (TRH-LI) fue de 220 ± 50 pg/mg de proteína en las células (n=6) y de 182 ± 21 pg/mg de proteína en el medio (n=9). La caracterización de TRH-LI por HPLC mostró que un 50% de la inmunorreactividad coeluía con la TRH sintética. La cromatografía de intercambio catiónico (SP-Sephadex C25) mostró que un 40% de la TRH-LI se comportó como la TRH sintética mientras que el 60% eluyó como sustancias neutras o acidas no retenidas, probablemente p-glu-glu-proamida. Estas células expresan el mRNA del precursor de la TRH como lo demuestra la presencia de un fragmento de 396 pb amplificado mediante RT-PCR y posteror Southern blot. Como conclusión, esta línea celular expresa TRH constituyendo un buen modelo para estudiar la regulación génica de la TRH y caracterizar bioquímicamente las sustancias relacionadas a este tripéptido.