Angiotensina II (AII) en las células epiteliales renales, MDCK

MARTINEZ, VERÓNICA; GARCIA, SILVIA I; NAHMOD, VICTOR E; PIGNATARO, OMAR; BRIGNONI, MIRTHA; RIVAROLA, VALERIA; KOVALOVSKY, DAMIAN; FINKIELMAN, SAMUEL; PIROLA, CARLOS J

Mar del Plata - Argentina

Congreso; XXXIX reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 1994

Sociedad Argentina de Investigaciones Clinicas

El sistema renina-angiotensina (SRA) local participa en la regulación de la función renal. Nuestro objetivo fue caracterizar la presencia de los componentes del SRA en las MDCK, células derivadas del epitelio tubular distal canino. Las MDCK se cultivan en 10% SFB en DMEM. Los experimentos se realizaron en células deprivadas de SFB durante 24 hs. Se detectó la presencia de AII mediante inmunofluorescencia indirecta visualizándose in-munorreactividad asociada a citoplasma y núcleo en células permeabilizadas con Tritón X-100. Mediante HPLC y RÍA se verificó que esta inmunorreactividad se comporta como AII sintética. Se demostró la presencia de una banda de 308 pb correspondiente al mRNA del angio-tensinógeno mediante RT-PCR y Southern Blot. Los extractos de MDCK contienen actividad hidrolítica del hipuril-hys-leu (2.46 ± 0.50' fmoles/cel.)/ inhibible por captopril luM, EDTA ImM y ausencia de NaCl en 62, 71, y 80%, respectivamente (n = 4, p < 0.05), indicando la presencia de enzima convertidora de angiotensina. El tratamiento con AII (0.1 uM) durante 24 hs indujo un aumento del 100% en la incorporación de 3H-timidina al DNA, efecto inhibible por saralasina luM y DuP 753 luM indicando que el receptor involucrado es del tipo ATI (n = 9, p < 0.05). La AII (luM, 1 a 90 minutos de incubación) no modificó los niveles de cANÍP. En resumen, las MDCK son un modelo conveniente para el estudio de los componentes del SRA y sus funciones en células epiteliales renales.